特許
J-GLOBAL ID：201203070709907211
SPFS(表面プラズモン励起増強蛍光分光法)により測定される蛍光シグナルの補正方法およびこれを用いたアッセイ方法、並びにこれらの方法に用いられる構造体および表面プラズモン共鳴センサー
発明者：
出願人/特許権者：
代理人 (1件)：
特許業務法人SSINPAT
公報種別：公開公報
出願番号（国際出願番号）：特願2010-181364
公開番号（公開出願番号）：特開2012-042233
出願日： 2010年08月13日
公開日（公表日）： 2012年03月01日
要約：
【課題】SPFSセンサー基板に複雑な構造を導入することなく、SPFSセンサー基板を構成する金属薄膜の厚さのばらつきに由来する電場増強のばらつきの影響を排除し、これによりSPFS等の測定精度や信頼性を高めることが可能となる、測定データの補正方法、およびこれを用いたアッセイ方法を提供する。【解決手段】表面プラズモン共鳴センサーについて測定される蛍光シグナル(Sm)について、金属薄膜を介することなく蛍光分子層が形成された領域(P)および金属薄膜を介して蛍光分子層が形成された領域(Q)で測定されるシグナル(Sp)および(Sq)から電場増強比Rを算出し、この電場増強比Rを用いて、補正されたシグナル(Sm1)に変換することを特徴とする蛍光シグナルの補正方法、並びに、この方法を用いたアッセイ方法。【選択図】図1
請求項（抜粋）：
透明誘電体部材(Tm)上に、金属薄膜(Mm)を介して蛍光色素(Dm)が固定されてなる表面プラズモン共鳴センサーにつき、表面プラズモン蛍光分光法を用いて測定される蛍光色素(Dm)由来の蛍光シグナル(Sm)について、
(k-1) 透明誘電体部材(Ts)と、
該透明誘電体部材(Ts)上に、金属薄膜を介することなく蛍光分子層(Fsp)が形成された領域(P)と、
該透明誘電体部材(Ts)上に、金属薄膜(Msq)を介して、蛍光分子層(Fsq)が形成された領域(Q)と
を含み、
該蛍光分子層(Fsq)および該蛍光分子層(Fsp)がともに同一の蛍光色素(Ds)から構成されており、
該透明誘電体部材(Tm)および該透明誘電体部材(Ts)がともに同一の透明誘電体からなり、
該金属薄膜(Mm)および該金属薄膜(Msq)がともに同一の金属からなる
構造体(X)であって、該金属薄膜(Msq)が該金属薄膜(Mm)と同じ厚さを有する対象構造体(Xt)について、
(i)前記領域(P)に対して、
該透明誘電体部材(Ts)の、該蛍光分子層(Fsp)が存在する面とは反対側の表面から、全反射条件となる入射角で、該蛍光シグナル(Sm)の測定において蛍光分子(Dm)を励起するために用いられる入射光と同一波長の入射光を照射することにより、
該領域(P)で発光した蛍光の量を全反射蛍光シグナル(Sp)として検出する工程と、
(ii)該工程(i)の前に、該工程(i)と同時に、あるいは該工程(i)の後に、前記領域(Q)に対して、
該透明誘電体部材(Ts)の、該蛍光分子層(Fsq)が存在する面とは反対側の表面から、全反射条件となる入射角で該工程(i)の場合と同一波長の入射光を照射することにより、
該領域(Q)で発光した蛍光の量を電場増強蛍光シグナル(Sq)として検出する工程と
(iii)該工程(i)および(ii)を経て得られる該全反射蛍光シグナル(Sp)と該電場増強蛍光シグナル(Sq)を用いて下記式(1)
R = Sq / Sp (1)
に基づき電場増強比Rを算出する工程と、
を経て得られる該電場増強比RであるRtと、
(k-2)該構造体(X)であって、該対象構造体(Xt)以外の構造体である参照構造体(Xr)について、該対象構造体(Xt)の場合と同じ波長の入射光を用いて、上記工程(i)〜(iii)を経て得られる該電場増強比RであるRrと
を用いて、下記式(2)
Sm1 = Sm0 × (Rr / Rt) (2)
に基づき、補正前の蛍光シグナル(Sm)である未補正蛍光シグナル(Sm0)を補正蛍光シグナル(Sm1)に変換する
ことを特徴とする蛍光シグナルの補正方法。
IPC (2件)：
FI (2件)：
G01N33/543 595
, G01N33/48 Z
2G045AA13
, 2G045AA16
, 2G045CA25
, 2G045CA26
, 2G045CB03
, 2G045CB04
, 2G045CB07
, 2G045CB17
, 2G045CB26
, 2G045DA13
, 2G045DA14
, 2G045DA30
, 2G045DA35
, 2G045DA36
, 2G045DA54
, 2G045DA60
, 2G045DA78
, 2G045FA12
, 2G045FA14
, 2G045FA29
, 2G045FB02
, 2G045FB03
, 2G045FB07
, 2G045FB12
, 2G045FB15
, 2G045FB19
, 2G045GC11
, 2G045GC15
, 2G045JA02
, 2G045JA07
