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J-GLOBAL ID:201302219493465127   整理番号:13A0357378

Saccharomyces cerevisiaeにおけるグリコシル化効率とグリカン構造を改変するための複合システム

A Combined System for Engineering Glycosylation Efficiency and Glycan Structure in Saccharomyces cerevisiae
著者 (4件):
資料名:
巻: 79  号:ページ: 997-1007  発行年: 2013年02月 
JST資料番号: A0427A  ISSN: 0099-2240  CODEN: AEMIDF  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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S.cerevisiaeでヒト型N-グリカンを有する組換え蛋白質を発現させるための,新たなN-グリコシル化経路を構築した。そのために,脂質結合型オリゴ糖の合成に関与するALG11とALG3遺伝子を二重欠失し,ネイティブな高マンノース型構造を形成できないS.cerevisiae変異株を用いた。この変異株に人工フリッパーゼとLeishmania brasiliensisのオリゴ糖トランスフェラーゼを導入した。それによって,脂質結合型Man3GlcNAc2に由来するMan3GlcNAc2構造を,ゴルジ体に結合したヒトN-アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼIならびにIIが直接利用できるようにした。ニワトリ卵白リゾチームに対するモノクローナル抗体をモデル蛋白質とした実験から,N-グリコシル化蛋白質の発現法としての本法の有効性を示唆した。
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分類 (3件):
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代謝と栄養  ,  遺伝子操作  ,  微生物,組織・細胞培養による物質生産一般 
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