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J-GLOBAL ID：201302225509424507   整理番号：13A1041086

緑膿菌由来の新規のホスホリパーゼC/スフィンゴミエリナーゼの高水準過剰発現,精製及び結晶化

High-level over-expression, purification, and crystallization of a novel phospholipase C/sphingomyelinase from Pseudomonas aeruginosa

著者 (5件)： SURNAMETRUAN Givennamedaphne (Swiss Light Source, Paul Scherrer Inst., 5232 Villigen, CHE) ,  SURNAMEVASIL Givennameadriana (Dep. of Microbiology, Univ. of Colorado, School of Medicine, Anschutz Medical Center, Aurora, CO 80045, USA) ,  SURNAMESTONEHOUSE G. (Dep. of Microbiology, Univ. of Colorado, School of Medicine, Anschutz Medical Center, Aurora, CO 80045, USA) ,  SURNAMEVASIL G. L. (Dep. of Microbiology, Univ. of Colorado, School of Medicine, Anschutz Medical Center, Aurora, CO 80045, USA) ,  SURNAMEPOHL Givennameehmke (Dep. of Chemistry & School of Biological and Biomedical Sciences, Durham Univ., Durham DH1 3LE, GBR)
資料名： Protein Expression and Purification  (Protein Expression and Purification)
巻： 90  号： 1  ページ： 40-46  発行年： 2013年07月 
JST資料番号： W0282A  ISSN： 1046-5928  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 日和見病原菌緑膿菌由来の溶血性のホスホリパーゼC/スフィンゴミエリナーゼPlcHは細菌及び菌類病原体の広範囲で確認されている,増加しつつある病原因子のメンバーである。緑膿菌の中で,PlcHは17kDaシャペロン(PlcR2)と同時発現され,Xcp(TypeII)分泌系により,細胞膜及び外膜を経由してツィンアルギニントランスロカーゼ(TAT)により,約95kDaの完全に折畳まれたヘテロ二量体(PlcHR2)として分泌される。PlcHR2は緑膿菌感染モデルにおいて重要な病原因子であることが示され,哺乳類の内皮細胞に対しピコモル濃度で,選択的に細胞毒性を示す。ここに,既存の緑膿菌における蛋白質過剰発現から始まって,結晶化における界面活性剤の使用,最先端のμフォーカスシンクロトロンビームラインを利用したデータ収集などの様々な課題をいかに克服したかを報告した。このヘテロ二量体蛋白質複合体の既存の回折データを分解能4Åまで集める一方で,最大直径10μのL-セレノメチオニン代替PlcHR2の針状結晶を最大分解能2.75Åでデータセットを集めるために利用した。Copyright 2013 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： 緑膿菌 ,  *ホスホリパーゼC ,  *スフィンゴミエリナーゼ ,  *遺伝子発現 ,  *精製 ,  *結晶化 ,  二量体 ,  細胞毒性 ,  データ収集 ,  微結晶 ,  回折 ,  アミノ酸 ,  脂肪族アミン ,  脂肪族カルボン酸 ,  セレニド
準シソーラス用語： 過剰発現 ,  *蛋白質結晶化 ,  *蛋白質精製 ,  ヘテロ二量体

分類 (2件)： 微生物の生化学  (EG03020N) ,  蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N)

物質索引 (1件)： L-セレノメチオニン

タイトルに関連する用語 (7件)： 緑膿菌 ,  ホスホリパーゼC ,  スフィンゴミエリナーゼ ,  高水準 ,  過剰発現 ,  精製 ,  結晶化