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J-GLOBAL ID：201302230268219064   整理番号：13A0495898

Microbacterium luteolum JCM9174における2種類のNADH依存性3-キヌクリジノンレダクターゼの遺伝子クローニングと特性化

Gene Cloning and Characterization of Two NADH-Dependent 3-Quinuclidinone Reductases from Microbacterium luteolum JCM 9174

著者 (7件)： ISOTANI Kentaro (Toyama Prefectural Univ., Toyama, JPN) ,  KUROKAWA Junji (Toyama Prefectural Univ., Toyama, JPN) ,  SUZUKI Fumiko (Toyama Prefectural Univ., Toyama, JPN) ,  NOMOTO Syunsuke (Toyama Prefectural Univ., Toyama, JPN) ,  NEGISHI Takashi (Toyama Prefectural Univ., Toyama, JPN) ,  MATSUDA Michiko (Toyama Prefectural Univ., Toyama, JPN) ,  ITOH Nobuya (Toyama Prefectural Univ., Toyama, JPN)
資料名： Applied and Environmental Microbiology  (Applied and Environmental Microbiology)
巻： 79  号： 4  ページ： 1378-1384  発行年： 2013年02月 
JST資料番号： A0427A  ISSN： 0099-2240  CODEN： AEMIDF  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 3-キヌクリジノンから3-キヌクリジノールへの還元活性を有する微生物を,約200菌株からスクリーニングした。12菌株が3-キヌクリジノンを還元し,そのうち,M.luteolum JCM9174が,>99%の不斉収率で(R)-(-)-3-キヌクリジノールを産生した。そこで,JCM9174から3-キヌクリジノン還元酵素を精製し,その部分アミノ酸配列に基づいて遺伝子クローニングを行った。その結果,255アミノ酸残基をコードするbacC遺伝子と,252アミノ酸残基をコードするqnr遺伝子を見いだした。いずれの酵素も,短鎖アルコールデヒドロゲナーゼ/レダクターゼファミリーに属していた。両酵素を組換え蛋白質として大腸菌で発現・精製し,その生化学的性質を調べた。QNRが3-キヌクリジノンに高い特異性を示したのに対して,BacCは3-キヌクリジノンに加えて,2-アセチルピリジンと7-オキサビシクロ[4,1,0]ヘプタン-2-オンにも弱いながら酵素活性を示した。BacCはバシリシン生合成にも関わっていると推察できた。QNRやBacCを用いる酵素反応系が,(R)-(-)-3-キヌクリジノール生産系として利用可能性があることを示唆した。

シソーラス用語： 微生物学的反応 ,  酵素的合成 ,  細菌 ,  *アルコールオキシドレダクターゼ ,  遺伝子クローニング ,  遺伝子 ,  アミノ酸配列 ,  相同性 ,  酵素反応速度論 ,  基質特異性 ,  pH依存性 ,  立体特異性反応
準シソーラス用語： *3-キヌクリジノンレダクターゼ ,  bacC遺伝子 ,  Microbacterium luteolum ,  qnr遺伝子 ,  微生物還元 ,  微生物変換

分類 (2件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  微生物の生化学  (EG03020N)

物質索引 (2件)： (R)-3-キヌクリジノール ,  3-キヌクリジノン

タイトルに関連する用語 (7件)： Microbacterium ,  NADH ,  依存性 ,  3-キヌクリジノン ,  レダクターゼ ,  遺伝子クローニング ,  特性化