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J-GLOBAL ID：201302241918209982   整理番号：13A1494330

Luman-リクルート因子N-末端に対するモノクローナル抗体の調製および同定

Preparation and identification of monoclonal antibodies against Luman-recruiting factor N-terminal

著者 (8件)： Li Xiao (Animal Biotechnology Key Lab. of Ministry of Agriculture, Coll. of Animal Medicine, Northwest A&F Univ., Shaanxi ...) ,  Lan Xiangli (Animal Biotechnology Key Lab. of Ministry of Agriculture, Coll. of Animal Medicine, Northwest A&F Univ., Shaanxi ...) ,  Xu Xiaobin (Animal Biotechnology Key Lab. of Ministry of Agriculture, Coll. of Animal Medicine, Northwest A&F Univ., Shaanxi ...) ,  Yang Yanzhou (Animal Biotechnology Key Lab. of Ministry of Agriculture, Coll. of Animal Medicine, Northwest A&F Univ., Shaanxi ...) ,  Zhao Baoyu (Animal Biotechnology Key Lab. of Ministry of Agriculture, Coll. of Animal Medicine, Northwest A&F Univ., Shaanxi ...) ,  Jin Yaping (Animal Biotechnology Key Lab. of Ministry of Agriculture, Coll. of Animal Medicine, Northwest A&F Univ., Shaanxi ...) ,  Wang Aihua (Animal Biotechnology Key Lab. of Ministry of Agriculture, Coll. of Animal Medicine, Northwest A&F Univ., Shaanxi ...) ,  Lu Ray (Animal Biotechnology Key Lab. of Ministry of Agriculture, Coll. of Animal Medicine, Northwest A&F Univ., Shaanxi ...)
資料名： Xibei Nonglin Keji Daxue Xuebao(Zirankexueban)  (Xibei Nonglin Keji Daxue Xuebao(Zirankexueban))
巻： 40  号： 12  ページ： 1-7,14  発行年： 2012年 
JST資料番号： C5021A  ISSN： 1671-9387  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】本研究では,Lu-man-レクルート因子N末端(LRF-N)に対するモノクローナル抗体を開発し,特徴付けた。【方法】PCRを用いてLRF遺伝子N-末端の194bpフラグメントを増幅し,そして,組換体プラスミドpGEX-LRF-Nを構築した。次に,GST-LRF-N組換蛋白質を発現させ,雌のBALB/cマウス(週齢6~8週間)の免疫化に用いる前に10日に1度精製した。脾臓を4回目の免疫化の3日後に抽出し,そして,脾臓細胞をSP2/0細胞によって融解した。陽性サンプルの選択および同定と,核型,分泌物安定性,およびGST-LRF-Nに対する得た3つのモノクローナル抗体(それぞれ2AC9,2AG10,および3G7と命名MAb)の同定を,間接ELISAとウエスタンブロット検査によって最終的に実施した。【結果】組換体プラスミドpGEX-LRF-Nは大腸菌BL21(DE3)の中で効率的に発現し,そして,発現したGST-LRF-N蛋白質の分子量は33kuであり,マウスの陽性抗血清はGST-LRF-N蛋白質を認識できた。MAbs2AC9,2AG10,および3G7は,pGEX-Luman蛋白質,pGEX-Atac2蛋白質,およびpGEX-4T-1蛋白質からpGEX-LRF-Nを特異的に認識できた。アイソタイプ分析の結果は,MAbs2AC9,2AG10,および3G7が,それぞれIgG2a,IgM,およびIgGlサブクラスに分類できたことを示した。【結語】2AC9,2AG10,および3G7ハイブリドーマ細胞から得たMAbsには,良い単一特異性があり,抗体を安定して分泌し,その結果,マウス組織のLRF蛋白質の更なる研究に使用できる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： モノクローナル抗体 ,  *末端基 ,  ウェスタンブロット法 ,  大腸菌 ,  腫瘍細胞 ,  培養細胞 ,  フラグメント ,  免疫グロブリンG ,  組換タンパク質 ,  プラスミド
準シソーラス用語： IgG2a ,  *N末端 ,  SP2/0細胞 ,  ウエスタンブロット ,  大腸菌BL21(DE3)

分類 (1件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (5件)： 因子 ,  N-末端 ,  モノクローナル抗体 ,  調製 ,  同定