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J-GLOBAL ID：201302250890657070   整理番号：13A0153406

ヒト腎臓細胞系において発現されるヒト組換インターロイキン-17Aの予想外のムチン型O-グリコシル化及びホスト特異N-グリコシル化

Unexpected mucin-type O-glycosylation and host-specific N-glycosylation of human recombinant interleukin-17A expressed in a human kidney cell line

著者 (9件)： GEOGHEGAN Kieran F. (Pfizer Worldwide Res., Groton, CT 06340, USA) ,  SONG Xi (Pfizer Worldwide Res., Groton, CT 06340, USA) ,  HOTH Lise R. (Pfizer Worldwide Res., Groton, CT 06340, USA) ,  FENG Xidong (Pfizer Worldwide Res., Groton, CT 06340, USA) ,  SHANKER Suman (Pfizer Worldwide Res., Groton, CT 06340, USA) ,  QUAZI Amira (Pfizer Worldwide Res., Cambridge, MA 02140, USA) ,  LUXENBERG Deborah P. (Pfizer Worldwide Res., Cambridge, MA 02140, USA) ,  WRIGHT Jill F. (Pfizer Worldwide Res., Cambridge, MA 02140, USA) ,  GRIFFOR Matthew C. (Pfizer Worldwide Res., Groton, CT 06340, USA)
資料名： Protein Expression and Purification  (Protein Expression and Purification)
巻： 87  号： 1  ページ： 27-34  発行年： 2013年01月 
JST資料番号： W0282A  ISSN： 1046-5928  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Tヘルパー細胞由来のサイトカイン,インターロイキン-17A(IL-17A)は34-38kDaの可変的グリコシル化ジスルフィド結合したホモ二量体である。そのポリペプチド単量体はAsn68に標準のN-グリコシル化部位を含有し,ヒト組換えIL-17Aは,メリチンシグナル配列とN末端ヘキサヒスチジン標識を持つ融合蛋白質として,ヒト腎臓(HEK293)細胞で発現される時,部分的にN-グリコシル化された。トリプシン性N-グリコペプチド63-69のOrbitrap質量分析の結果,N-グリコシル化は培養腎臓細胞系のGalNAc末端型の特性を持った。IL-17A単量体の質量スペクトルは非グリコシル化及びN-グリコシル化ポリペプチドのそれぞれの質量から+948Daシフトしたピークを包含した。これらはムチン様構造-GalNAc(-NeuNAc)-Gal-NeuNAcをもつThr26の予測不可能な部分的O-グリコシル化によった。同一のO-グリコシル化は,異なるN末端配列を持つが,HEK293細胞で発現される商業的に供給された組換えIL-17Aにも見られた。それ故,腎臓宿主細胞系は組換えIL-17AにおけるN-グリコシル化の特徴的パターンを課すのみならず,T細胞由来のサイトカインに存在しないと思われているO-グリコシル化を追加的に作成した。組換え蛋白質発現に対する哺乳類宿主細胞系は生成物のN-グリコシル化の特徴的パターンを一般に課すが,本研究は,宿主が普通は恐らくO-グリコシル化されない蛋白質を,どの様に予期せずにO-グリコシル化するかを例証した。Copyright 2013 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： ヒト ,  *インターロイキン ,  *グリコシル化 ,  HEK293細胞 ,  質量分析 ,  タンデム質量分析 ,  生物学的比較
準シソーラス用語： N-グリコシル化 ,  *インターロイキン17A ,  細胞特異性 ,  O-グリコシル化

分類 (2件)： 細胞生理一般  (EF02010S) ,  サイトカイン  (EB08090G)

タイトルに関連する用語 (9件)： ヒト ,  腎臓細胞 ,  発現 ,  組換 ,  インターロイキン-17A ,  予想 ,  ムチン ,  O-グリコシル化 ,  N-グリコシル化