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J-GLOBAL ID：201302259538015219   整理番号：13A0407913

Staphylococcus aureus由来NADP依存イソクエン酸デヒドロゲナーゼのクローニング,発現及び特性化

Cloning, Expression and Characterization of NADP-Dependent Isocitrate Dehydrogenase from Staphylococcus aureus

著者 (9件)： PRASAD U. Venkateswara (Sri Venkateswara Inst. of Medical Sciences, Dep. of Biotechnology, 517 507, Tirupati, IND) ,  VASU D. (Sri Venkateswara Inst. of Medical Sciences, Dep. of Biotechnology, 517 507, Tirupati, IND) ,  KUMAR Y. Nanda (Sri Venkateswara Univ., Dep. of Zoology, 517 502, Tirupati, IND) ,  KUMAR P. Santhosh (Sri Venkateswara Inst. of Medical Sciences, Dep. of Biotechnology, 517 507, Tirupati, IND) ,  YESWANTH S. (Sri Venkateswara Inst. of Medical Sciences, Dep. of Biotechnology, 517 507, Tirupati, IND) ,  SWARUPA V. (Sri Venkateswara Inst. of Medical Sciences, Dep. of Biotechnology, 517 507, Tirupati, IND) ,  PHANEENDRA B. V. (Sri Venkateswara Inst. of Medical Sciences, Dep. of Pathology, 517 507, Tirupati, IND) ,  CHAUDHARY Abhijit (Sri Venkateswara Inst. of Medical Sciences, Dep. of Microbiology, 517 507, Tirupati, IND) ,  SARMA P. V. G. K. (Sri Venkateswara Inst. of Medical Sciences, Dep. of Biotechnology, 517 507, Tirupati, IND)
資料名： Applied Biochemistry and Biotechnology. Part A. Enzyme Engineering and Biotechnology  (Applied Biochemistry and Biotechnology. Part A. Enzyme Engineering and Biotechnology)
巻： 169  号： 3  ページ： 862-869  発行年： 2013年02月 
JST資料番号： E0344C  ISSN： 0273-2289  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Krebs回路はStaphylococcus aureusの酸化還元状態を規定し,主に本菌の成長と病原性に寄与するイソクエン酸デヒドロゲナーゼ(IDH)の調節下にある。本研究ではS.aureuATCC12600からIDH遺伝子をpQE30ベクターSmaI部位からクローニングした;取得クローンをUVIDH1と命名した。クローン内挿入配列を決定し(受入番号HM067707),配列はデータベース報告の他のS.aureus株IDHと完全相同性を示し,S.aureusに存在する単一酵素であることを示し,また顕著な他菌種との配列相同性も認めた;しかし,NADP依存ヒトIDHとは24%の相同性のみを認めた。系統発生的には,S.aureus IDHはBacillus subtilisと極めて近縁で,他細菌とヒトIDHとは高度の変異性を認めた。クローンUVIDH1におけるIDH発現を1mM IPTGで誘導し,組換IDHを透過ニッケル金属キレートカラムで精製した;精製組換IDHはSDS-PAGE上で分子量40kDaの単一バンドを示し;イソクエン酸に対するK_mとV_maxはそれぞれ8.2±0.28及び525±25μMNADPH/mg/min,補因子NADPに関しては67.5±2.82μMV_max50.5±2.12μM NADPH/mg/minであった。Copyright 2013 Springer Science+Business Media New York Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *イソクエン酸デヒドロゲナーゼ ,  *黄色ぶどう球菌 ,  遺伝子クローニング ,  系統発生 ,  ヌクレオチド配列 ,  相同性 ,  クエン酸サイクル ,  酵素反応速度論

分類 (1件)： 酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (6件)： Staphylococcus ,  NADP ,  イソクエン酸デヒドロゲナーゼ ,  クローニング ,  発現 ,  特性化