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J-GLOBAL ID:201302269720137538   整理番号:13A1431765

クミン(Cuminum cyminum L.)におけるAgrobacterium媒介遺伝的形質転換と植物再生の効率的方法

An Efficient Method for Agrobacterium-Mediated Genetic Transformation and Plant Regeneration in Cumin (Cuminum cyminum L.)
著者 (4件):
資料名:
巻: 171  号:ページ: 1-9  発行年: 2013年09月 
JST資料番号: E0344C  ISSN: 0273-2289  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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クミンは多様に適用できる1年性でハーブの医学的に重要な植物である。Agrobacterium媒介遺伝的形質転換の効率的で再現可能な方法を初めて確立した。カルス誘導なしに直接再生方法を,0.5μM 6-ベンジルアデニンと2.0μM α-ナフタレン酢酸を補給したガンボーグのB5培地で外植片物質として胚を使用することにより最適化した。約1020個の胚(バッチ当り平均255個の胚)を形質転換条件の最適化に使用した。これらの条件は,OD600が0.6のAgrobacterium細胞懸濁液を共培養時間が72時間,300μMアセトシリンゴンとカミソリの刃を使用して傷つけた外植片であった。前培養で伸長させた胚を最適化した条件をしようして処理した。約720個の胚(バッチ当り平均180個の胚)を形質転換に使用し,共培養95%の胚が共培養後に一時的にβ-グルクロニダーゼ発現を示した。形質転換されたと推測される胚を若芽増殖のためにB5培地で培養した。選択後,そして根づいた21の再生した植物が得られた。T0植物はβ-グルクロニダーゼ発現をして,PCR増幅により,それぞれハイグロマイシン-ホスホトランスフェラーゼIIとβ-グルクロニダーゼ遺伝子の0.96と1.28kb断片の組込みが確認された。本研究において,形質転換率は1.5% が示され,硬化ステージで,全体で11トランスジェニック植物が取得され,しかしながら,硬化中に4植物のみが特定の気候に慣れることができた。硬化した植物の遺伝子コピー数をサザンブロット分析により解析し,単一コピーの組込みが観察された。クミンのAgrobacterium媒介遺伝的形質転換の最初に成功した試みであった。Copyright 2013 Springer Science+Business Media New York Translated from English into Japanese by JST.
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分類 (2件):
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遺伝子操作  ,  発生,成長,分化 
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