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J-GLOBAL ID：201302277589551636   整理番号：13A0316638

2本鎖RNA分子の対流相互作用媒体モノリスアニオン交換カラムを利用する高速大量処理精製

High-throughput purification of double-stranded RNA molecules using convective interaction media monolithic anion exchange columns

著者 (6件)： ROMANOVSKAYA Alesia (Dep. of Biosciences, Univ. of Helsinki, Biocenter 2, P.O. Box 56, 00014 Univ. of Helsinki, FIN) ,  SARIN L. Peter (Dep. of Biosciences, Univ. of Helsinki, Biocenter 2, P.O. Box 56, 00014 Univ. of Helsinki, FIN) ,  SARIN L. Peter (Inst. of Biotechnology, Univ. of Helsinki, Biocenter 2, P.O. Box 56, 00014 Univ. of Helsinki, FIN) ,  BAMFORD Dennis H. (Dep. of Biosciences, Univ. of Helsinki, Biocenter 2, P.O. Box 56, 00014 Univ. of Helsinki, FIN) ,  BAMFORD Dennis H. (Inst. of Biotechnology, Univ. of Helsinki, Biocenter 2, P.O. Box 56, 00014 Univ. of Helsinki, FIN) ,  PORANEN Minna M. (Dep. of Biosciences, Univ. of Helsinki, Biocenter 2, P.O. Box 56, 00014 Univ. of Helsinki, FIN)
資料名： Journal of Chromatography A  (Journal of Chromatography A)
巻： 1278  ページ： 54-60  発行年： 2013年02月22日 
JST資料番号： C0278B  ISSN： 0021-9673  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： RNA干渉と大スケールでの2本鎖RNA(dsRNA)合成の新たなコスト効率の高い方法の最近の進歩は,種々の長さのdsRNA分子にふさわしいロバストな高速精製法の需要拡大に拍車をかける。この課題に対処するために筆者らは,対流相互作用媒体(CIM)モノリスカラムを利用するアニオン交換クロマトグラフィーに基づくdsRNAの精製のための改良法を開発した。カラム性能を評価するために,筆者らは,バクテリオファージ T7 DNA-依存性RNAポリメラーゼとphi6 RNA-依存性RNAポリメラーゼを含む一連のdsRNA分子(58-1810bp)を1段階酵素反応で合成した。また,25-27bpの低分子干渉RNAをバクテリオファージphi6のゲノムdsRNAのdicer消化によって作り出した。筆者らは,直線的に拡大縮小が可能なCIMモノリス4級アミン(QA)カラムが高純度のdsRNA製剤を得るための標準精製法(例えば,LiCl沈殿法)に対する迅速ですぐれた代替法として利用できることを示した。dicer処理後の不純物がQA CIMモノリスカラムによって迅速に効率的に除去され,治療応用にふさわしい高純度のsiRNA分子を与える。さらに,1kb以下のdsRNA分子のベースライン分離が非変性条件下で達成された。Copyright 2013 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *二本鎖RNA ,  *クロマトグラフ用カラム ,  *陰イオン交換 ,  *処理 ,  *精製 ,  RNA干渉 ,  RNA合成 ,  効率 ,  *対流 ,  T7ファージ ,  RNAポリメラーゼ ,  酵素反応 ,  ゲノム ,  RNアーゼ ,  分子標的治療薬 ,  不純物 ,  *相互作用
準シソーラス用語： コスト効率 ,  ダイサー ,  *モノリスカラム ,  核酸薬剤 ,  *大量処理

分類 (2件)： クロマトグラフィー,電気泳動  (CC01050S) ,  核酸一般  (EB04010U)

タイトルに関連する用語 (10件)： 2本鎖RNA ,  分子 ,  対流 ,  相互作用 ,  媒体 ,  モノリス ,  アニオン交換 ,  カラム ,  大量処理 ,  精製