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J-GLOBAL ID：201302284609635030   整理番号：13A1233227

Neocallimastix patriciarum J11由来の熱安定性かつpH安定性セロビオヒドロラーゼのクローニング及び特性化

Cloning and characterization of a thermostable and pH-stable cellobiohydrolase from Neocallimastix patriciarum J11

著者 (4件)： WANG Hui-chang (Dep. of Biochemical Sci. and Technol., National Taiwan Univ., Taipei, Taiwan) ,  CHEN Yo-chia (Dep. of Biological Sci. and Technol., National Pingtung Univ. of Sci. and Technol., Pingtung, Taiwan) ,  HUANG Ching-tsan (Dep. of Biochemical Sci. and Technol., National Taiwan Univ., Taipei, Taiwan) ,  HSEU Ruey-shyang (Dep. of Biochemical Sci. and Technol., National Taiwan Univ., Taipei, Taiwan)
資料名： Protein Expression and Purification  (Protein Expression and Purification)
巻： 90  号： 2  ページ： 153-159  発行年： 2013年08月 
JST資料番号： W0282A  ISSN： 1046-5928  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Neocallimastix patriciarum J11のcDNAライブラリーから分離し,celAと命名した1888bpのcDNAをクローニングした。celAは510アミノ酸のJ11 CelAをコードする1530bpのオープンリーディングフレームを持つ。J11 CelAの一次構造分析により,N末端の完全なセルロース結合ドメインにAsn,Ala,Gly,Gln及びProリッチなリンカーが続き,C末端のグリコシルヒドロラーゼファミリー6触媒ドメインで終了することが分かった。成熟J11 CelAを大腸菌で過剰発現させ,均質になるまで精製した。この酵素はオオムギβ-グルカン及びリケナンに対し高比活性,カルボキシメチルセルロース(CMC),アビセル及びリン酸膨潤アビセル(PSA)に対し低比活性であった。アビセル加水分解物がセロビオースであったことは,J11 CelAは典型的なセロビオヒドロラーゼであることを示した。組換えJ11 CelAは6.0に最適pHを持ち,pH(5.2-11.3)の広範囲に渡って安定であった。酵素は最適温度が50°Cで,70°C,1hの処理に対して最大活性のほぼ50%を維持した。1mMのコバルト及びFe³⁺は酵素活性を大きく活性化した。結晶セルロース分解活性を持つ熱安定性でpH安定性な酵素であることから,J11 CelAはバイオエタノール工業に対し潜在的候補である。Copyright 2013 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *セロビオヒドロラーゼ ,  再生エネルギー ,  アミノ酸配列 ,  安定性 ,  酵素活性度 ,  タンパク質合成 ,  分子遺伝現象 ,  精製 ,  *組換タンパク質 ,  pH安定性 ,  温度安定性 ,  組換蛋白質発現 ,  蛋白質精製 ,  ツボカビ門 ,  微生物
準シソーラス用語： ツボカビ類 ,  Neocallimastix patriciarum

分類 (3件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J) ,  蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N) ,  微生物の生化学  (EG03020N)

タイトルに関連する用語 (6件)： Neocallimastix ,  熱安定性 ,  pH安定性 ,  セロビオヒドロラーゼ ,  クローニング ,  特性化