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J-GLOBAL ID:201402202577259570   整理番号:13A0583479

最適化された逆のPCRとTAIL-PCRに基づく綿のミトコンドリアの2倍のコピーatpA遺伝子の側方配列のための高効率ゲノムウォーキング方法

High efficiency genome walking method for flanking sequences of cotton mitochondrial double-copy atpA gene based on optimized inverse PCR and TAIL-PCR
著者 (10件):
資料名:
巻: 28  号:ページ: 104-115  発行年: 2012年 
JST資料番号: C2184A  ISSN: 1000-3061  CODEN: SGXUED  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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2倍のコピー遺伝子の側方配列のクローン化は,分子生物学の課題である。最適化された逆PCR(iPCR)をTAIL-PCRと結合することによってこの問題を解決するために方法を開発した。第一に,サザンブロット法分析は,標的遺伝子を含んだ適当な長さ制限酵素断片を採取し,適当な制限酵素を決定するのに用いられた。次に,最適化されたiPCRは,遺伝子の切り離されたコピーを含んだ制限酵素断片を増幅するために行われた。得られた順序に基づいて,TAIL-PCRは,遺伝子の更なるフランキング領域を増幅するために実行された。この方法で,新世界綿の細胞質雄無菌(CMS)線と維持装置線でミトコンドリアatpA遺伝子のEcoR I制限酵素断片(2.2-5.1 kb)と後III制限酵素断片(8.5-11.7 kb)の全てを得た。結果は,この方法が2倍のコピー遺伝子の側方の配列のクローンをつくる効果的なアプローチであることを示した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST
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分類 (4件):
分類
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バイオアッセイ  ,  繊維料作物  ,  細胞構成体一般  ,  遺伝子の構造と化学 

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