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J-GLOBAL ID:201402214102794607   整理番号:14A1022509

Pichia pastorisにおけるPleurotus ostreatus由来マンガンスーパーオキシドジスムターゼ(PoMn-SOD)の高レベル発現

High-level Expression of a Manganese Superoxide Dismutase (PoMn-SOD) from Pleurotus ostreatus in Pichia pastoris
著者 (7件):
資料名:
巻: 174  号:ページ: 259-269  発行年: 2014年09月 
JST資料番号: E0344C  ISSN: 0273-2289  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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Pleurotus ostreatus スーパーオキシドジスムターゼ(PoMn-SOD)の全長cDNAをクローニングし,Pichia pastorisにおいて,pPIC9Kベクターを用いてアルコールオキシダーゼ1プロモーター制御下で分泌シグナルペプチド(α-ファクター)とともに発現させることに成功した。ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)およびウェスタンブロット法の結果,21.8kDaの組換えPoMn-SODタンパク質が培養液中に分泌されたことが示された。非変性PAGE実験から,組換えPoMn-SODは機能的に活性のある形で分泌され,その発現系は酸活性化過程を必要としないことが確認された。振とうフラスコ培養において発現レベルに影響する因子の最適化を行った。最大酵素活性(156.9U/mg)は,初期培地pH6.0,誘導時間6日目,メタノール濃度0.7%(v/v)の条件下において観察された。本研究は,P.pastorisにおける組換えPoMn-SODの分泌発現についての最初の報告であり,将来の実用的応用において参考となるだろう。Copyright 2014 Springer Science+Business Media New York Translated from English into Japanese by JST.
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分類 (3件):
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遺伝子発現  ,  微生物,組織・細胞培養による物質生産一般  ,  微生物の生化学 
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