文献

J-GLOBAL ID：201402221999084808   整理番号：14A0381863

短縮型ガイドRNAによるCRISPR-Casヌクレアーゼ特異性の向上

Improving CRISPR-Cas nuclease specificity using truncated guide RNAs

著者 (9件)： FU Yanfang (Massachusetts General Hospital, Massachusetts, USA) ,  SANDER Jeffry D (Massachusetts General Hospital, Massachusetts, USA) ,  REYON Deepak (Massachusetts General Hospital, Massachusetts, USA) ,  CASCIO Vincent M (Massachusetts General Hospital, Massachusetts, USA) ,  JOUNG J Keith (Massachusetts General Hospital, Massachusetts, USA) ,  FU Yanfang (Harvard Medical School, Massachusetts, USA) ,  SANDER Jeffry D (Harvard Medical School, Massachusetts, USA) ,  REYON Deepak (Harvard Medical School, Massachusetts, USA) ,  JOUNG J Keith (Harvard Medical School, Massachusetts, USA)
資料名： Nature Biotechnology  (Nature Biotechnology)
巻： 32  号： 3  ページ： 279-284  発行年： 2014年03月 
JST資料番号： H0870A  ISSN： 1087-0156  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 短報  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： CRISPR(Clustered,regularly interspaced,short palindromic repeat)RNA誘導性ヌクレアーゼ(RGN)は極めて効率的なゲノム編集ツールである。Cas9(CRISPR-associated9)のRGNは,標的DNA配列に相補的な20ヌクレオチドを含むガイドRNA(gRNA)によってゲノム遺伝子座に誘導される。しかし,RGNは意図した標的とは5ヌクレオチドも異なる部位に変異を誘導することがある。今回我々は,20ヌクレオチド未満という短い標的相補性領域を持つ短縮型gRNAにより,目的とするゲノム編集の効率が損なわれることなく,一部の標的外部位での望ましくない変異生成が5000分の1以下に抑制されることを示す。加えて,短縮型gRNAを使用すると,DNAにニックを導入するCas9変異体対(対をなすニッカーゼ)によって誘導される標的外作用も減少させることができる。今回の結果は,Cas9ヌクレアーゼまたはニッカーゼ対の特異性を向上させる簡単で効率的な方法を示すものである。Copyright Nature Publishing Group 2014

シソーラス用語： *ヌクレアーゼ ,  *パリンドローム ,  RNA【核酸】 ,  *基質特異性 ,  DNA鎖切断 ,  遺伝子 ,  培養細胞 ,  *ヌクレオチド配列
準シソーラス用語： *Cas9ヌクレアーゼ ,  *CRISPR配列 ,  EGFP遺伝子 ,  U2OS細胞 ,  ガイドRNA

分類 (2件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  酵素の応用関連  (EB09100B)

タイトルに関連する用語 (5件)： ガイドRNA ,  CRISPR ,  CAS ,  ヌクレアーゼ ,  特異性