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J-GLOBAL ID:201402233520484201   整理番号:13A1213136

昆明マウスとBALB/cマウスのインバリアント鎖のポリクローナル抗体製剤と配列変化分析

Polyclonal antibody preparation and sequence variation analysis of invariant chain of Kunming mouse and BALB/c mouse
著者 (7件):
資料名:
巻: 32  号:ページ: 715-720  発行年: 2012年 
JST資料番号: C2276A  ISSN: 1005-4545  CODEN: ZSXUF5  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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昆明マウスとBALB/cマウスの脾臓リンパ球は,分離され,その後,活性化のために10mg/mlのCon-Aを含むPRMI-1640培養物において培養された。全細胞RNAは抽出された。そして,インバリアント鎖(P31,P41)はRT-PCRによって得られた。そして,配列はDNAStarソフトウェアを使用して分析された。その後,BALB/cマウスP31/P41分子は,原核生物発現ベクターを造るために,pGEX-kgの複数のクローン化区域にクローンをつくられた。GST-P31/P41タンパク質はIPTG誘導によって発現された。そして,製造者の指示に従ってグルタチオン・セファロースTm 4B親和性コラムで精製され,精製されたGST-P31/P41タンパク質はフロイント補助剤で乳状にされ,ウサギ皮下免疫化のための油中ワクチンを調合した。配列の結果は,P31とP41が648bpと840bpで,その長さはそれぞれ215と279のアミノ酸をコード化していることを示した。配列アラインメントは,GenBankで公表された配列と比較すると,複数のヌクレオチドやアミノ酸の違いが,この2つの株のマウスのP31とP41の両方にあったことを示した。さらに,この2つのクローン化されたP31の間のヌクレオチド相同とアミノ酸相同は,それぞれ98.8%と98.6%であった。そして,この2つのクローン化されたP41の間のヌクレオチド相同とアミノ酸相同はすべて99.3%であった。その後,マウスP31/P41とヒトおよびチキンの相応するIi分子との配列比較が分析された。マウスとチキンの間のヌクレオチド相同とアミノ酸相同は,それぞれわずか55.0%と41%,またはそれ以上であった。マウスと人間の間のヌクレオチド相同とアミノ酸相同はそれぞれ79.0%と73.0%,あるいはそれ以上であった。ウサギ抗マウスP31/P41ポリクローナル血清抗体は,ELISAとウェスタンブロット法によって集められて,テストされた。昆明マウスとBALB/cマウスの間のIiの配列が完全に一致していないことを,これらの結果は示した。・・・Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST
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分類 (7件):
分類
JSTが定めた文献の分類名称とコードです
獣医学一般  ,  動物の診療・診療設備  ,  実験用生物  ,  造血系  ,  遺伝学研究法  ,  遺伝子の構造と化学  ,  遺伝子の複製 

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