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J-GLOBAL ID：201402234691021311   整理番号：14A0312323

タンパク質捕獲剤のための化学エピトープターゲッティング戦略:キナーゼAkt2のセリン474エピトープ

A Chemical Epitope-Targeting Strategy for Protein Capture Agents: The Serine 474 Epitope of the Kinase Akt2

著者 (6件)： NAG Arundhati (California Inst. Technol., CA, USA) ,  DAS Samir (California Inst. Technol., CA, USA) ,  YU Mary Beth (California Inst. Technol., CA, USA) ,  DEYLE Kaycie M. (California Inst. Technol., CA, USA) ,  MILLWARD Steven W. (California Inst. Technol., CA, USA) ,  HEATH James R. (California Inst. Technol., CA, USA)
資料名： Angewandte Chemie. International Edition  (Angewandte Chemie. International Edition)
巻： 52  号： 52  ページ： 13975-13979  発行年： 2013年 
JST資料番号： H0127B  ISSN： 1433-7851  CODEN： ACIEAY  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： ドイツ (DEU)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： タンパク質の特異的領域をターゲットとする目的で,完全なタンパク質上にある標的エピトープの典型的ペプチド断片に対する,モノクローナル抗体(mAb)は良く開発されている。本報告では,リン酸化部位の近くのターゲッティングエピトープ類に対する化学戦略について報告した。具体的には,Ser474残基を含むAkt2(すなわちプロテインキナーゼB(PKB))のC末端エピトープに対する合成捕獲剤を開発した。著者らのアプローチでは,タンパク質触媒捕獲(PCC)剤を調製するために,まず,エピトープの合成から開始した。初めに,リン酸化されたセリン474残基(pS474)を含む,32のアミノ酸よりなるAkt2C末端のポリペプチド断片(アミノ酸450~481)を用意した。次に,リン酸基にジピコリルアミン(DPA)型リガンドを含む二核亜鉛(II)複合体の選択的な結合を利用することで,化学的にpS474残基を修飾し,ビオチンラベルとアジド基がpS474部位近くに提示されるようにした。この実験から,ビオチンラベルとアジド基を有する亜鉛キレート(化合物1)を合成した。本戦略において,アジド基は,クリック反応のためのアンカー部位であり,ビオチンは,アッセイハンドルを提供し,32merポリペプチドは,触媒として機能した。本戦略を用いて,PCC薬剤モノリガンド,PCC薬剤ビリガンド,および,2種類のPCC薬剤トリリガンドを開発した。最も強い結合トリリガンドであるN-tLは,Akt2に対して約20nMの濃度で親和性を示した。

シソーラス用語： *タンパク質 ,  *エピトープ ,  ホスホトランスフェラーゼ ,  *セリン/トレオニンキナーゼ ,  ペプチド ,  モノクローナル抗体 ,  リン酸化 ,  化学合成 ,  アジド ,  ポリペプチド ,  配位子 ,  *親和性 ,  ELISA ,  *キレート化合物 ,  亜鉛化合物 ,  金属イオン ,  カルボン酸 ,  窒素複素環化合物 ,  ウレア化合物 ,  硫黄複素環化合物 ,  ビタミンB群
準シソーラス用語： Akt2 ,  ELISA試験 ,  キナーゼ ,  *クリック反応 ,  リガンド ,  *ペプチド断片 ,  亜鉛イオン ,  結合親和性

分類 (5件)： バイオアッセイ  (EA03060N) ,  生化学的分析法  (EA03030G) ,  蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N) ,  付加反応,脱離反応  (CF02030M) ,  抗原・抗体・補体一般  (ED04010A)

物質索引 (2件)： ジピコリルアミン ,  ビオチン

タイトルに関連する用語 (8件)： タンパク質 ,  捕獲 ,  化学 ,  戦略 ,  キナーゼ ,  Akt2 ,  セリン ,  エピトープ