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J-GLOBAL ID：201402237588232753   整理番号：13A1220191

ヒト・ファージ抗体ライブラリの構築とアミリンのヒト・モノクローナル抗体のスクリーニング

Construction of human phage antibody library and screening for human monoclonal antibodies of amylin

著者 (4件)： Gong Qian (Dep. of Endocrinology,General Hospital of Tianjin Medical Univ., Tianjin) ,  Li Changying (Res. Lab. for Tumor Immunity,Second Affiliated Hospital,Tianjin Medical Univ., Tianjin) ,  Chang Jiwu (Res. Lab. for Tumor Immunity,Second Affiliated Hospital,Tianjin Medical Univ., Tianjin) ,  Zhu Tiehong (Dep. of Endocrinology,General Hospital of Tianjin Medical Univ., Tianjin)
資料名： Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi  (Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi)
巻： 28  号： 6  ページ： 618-622  発行年： 2012年 
JST資料番号： C2523A  ISSN： 1007-8738  CODEN： XFMZFM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:構築されたヒト・ファージ抗体ライブラリのアミリンに対するモノクローナル抗体をスクリーニングし,それらの抗原特異性と組み合わさっている活動を同定すること。方法:ヒト免疫グロブリン遺伝子のH鎖Fdフラグメントと軽鎖は,RT-PCR法を使用して健常な提供者の末梢血リンパ球から増幅されて,ヒト・ファージ抗体ライブラリを生成するためにファージミドpComb3XSSに挿入された。軽鎖またはH鎖fd遺伝子の挿入は,SacI,XbaI,XhoIand,SpeIの消化の後でPCR法によって同定された。陽性クローンの1つは,DNA塩基配列決定法によって分析された。特定の抗アミリン・クローンはヒト・アミリン抗原に対して抗体ライブラリから保護された。そして,陽性クローンはファージ-ELISA分析で測定された。結果:0.8×10⁸メンバーとFabファージ抗体ライブラリは,約70%の有効性で構築された。DNA配列分析は,VH遺伝子がVH3遺伝子ファミリに属していたことを示し,Vλ遺伝子がVλ遺伝子ファミリに属していたことを示した。ヒト・アミリンをパンニング抗原として使用し,特異的抗アミリンFab抗体は,ライブラリを3回スクリーニングすることによって濃縮された。ファージ-ELISA分析法は,陽性クローンにはアミリン抗原に非常に良好な特異性があることを示した。結論:ファージ抗体ライブラリ構築と抗アミリンFab抗体の同定に成功は,ヒト抗アミリン抗体のさらなる検査と生成に基礎を提供する。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： *バクテリオファージ ,  *抗体 ,  ペプチドライブラリー ,  *アミロイド ,  ポリペプチド ,  *モノクローナル抗体 ,  性質 ,  抗原認識 ,  免疫グロブリンG ,  RT-PCR法 ,  リンパ球 ,  末梢血 ,  遺伝子 ,  PCR法 ,  DNA【核酸】 ,  ヌクレオチド配列 ,  クローン ,  ELISA ,  免疫グロブリンフラグメント ,  スクリーニング ,  抗原
準シソーラス用語： *ファージ ,  *抗体ライブラリー ,  *アミリン ,  抗原特異性 ,  ヒト免疫グロブリンG ,  末梢血リンパ球 ,  塩基配列 ,  Fab断片 ,  パンニング

分類 (4件)： ウイルス学一般  (EG04010J) ,  抗原・抗体・補体の生産と応用  (ED04030W) ,  蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N) ,  抗原・抗体・補体一般  (ED04010A)

タイトルに関連する用語 (8件)： ヒト ,  ファージ ,  抗体 ,  ライブラリ ,  構築 ,  アミリン ,  モノクローナル抗体 ,  スクリーニング