文献

J-GLOBAL ID：201402261160160047   整理番号：13A0616752

組み換えラクダの抗-SpaA-Nシングルドメイン抗体の生成と特性研究

Preparation and property study of the recombinant Camel anti-SpaA-N single domain antibodies

著者 (5件)： Lu Qingxia (Xinjiang Key Lab. of Biological Resources and Genetic Engineering,Coll. of Life Sci. and Technol.,Xinjiang Univ., Urumqi) ,  Qing Geletu (Xinjiang Key Lab. of Biological Resources and Genetic Engineering,Coll. of Life Sci. and Technol.,Xinjiang Univ., Urumqi) ,  Yang Chunjing (Xinjiang Key Lab. of Biological Resources and Genetic Engineering,Coll. of Life Sci. and Technol.,Xinjiang Univ., Urumqi) ,  Xia Xueqin (Xinjiang Key Lab. of Biological Resources and Genetic Engineering,Coll. of Life Sci. and Technol.,Xinjiang Univ., Urumqi) ,  Li Jiangwei (Xinjiang Key Lab. of Biological Resources and Genetic Engineering,Coll. of Life Sci. and Technol.,Xinjiang Univ., Urumqi)
資料名： Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi  (Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi)
巻： 28  号： 1  ページ： 55-58  発行年： 2012年 
JST資料番号： C2523A  ISSN： 1007-8738  CODEN： XFMZFM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:豚丹毒菌の表面感染防御抗原A(SpaA)に対するシングルドメイン抗体を得ること。方法:SpaA-N組み換えタンパク質を用いて,フタコブラクダVHHファージ・ディスプレイ・ライブラリから結合剤を保護した。塩基配列決定法の後,大腸菌BL21でタンパク質を過剰発現させるために,関与するVHH遺伝子断片をpET-30aベクターにサブクローニングされた。SpaA-Nによる組み換えVHHの結合特異性はウエスタン・ブロット法によって決定された。シングルドメイン抗体の熱安定性は,ELISAによって評価された。結果:スクリーニングの強化によって,2つのクローンは選択された。Ni-イオン・アフィニティー・クロマトグラフィーによって精製された組み換えシングルドメイン抗体は,SDS-PAGE上のMr29000,23000で単一帯を示した。ELISAの結果,VHHはその抗原を結合できることを示した。熱変性の後,VHHはリフォールディングの後で能力を結合している抗原を復元することができる。ウエスタン・ブロット法の結果,特異的な組み換えVHHがMr66000で豚丹毒菌の表面感染防御抗原を結合することを示した。高い熱安定性と良好な抗原結合性特異性を持つ2つのVHHシングルドメイン抗体は,フタコブラクダVHHファージ・ディスプレイ・ライブラリのスクリーニングによって特定された。結論:SpaA-Nを特にaggulatedした2つのシングルドメイン抗体が得られた。そして,それは豚丹毒菌感染に対するシングルドメイン抗体の免疫的役割に関するさらなる研究に基礎を提供する。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： ラクダ ,  *感染予防 ,  *抗体 ,  *抗原 ,  豚丹毒 ,  組換タンパク質 ,  ペプチドライブラリー ,  ヌクレオチド配列 ,  大腸菌 ,  タンパク質合成 ,  分子遺伝現象 ,  ベクター ,  遺伝子クローニング ,  熱安定性 ,  ELISA ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  SDS-PAGE ,  熱変性 ,  折畳み構造 ,  ウェスタンブロット法 ,  ブタの病気
準シソーラス用語： *感染防御 ,  *防御抗原 ,  ファージディスプレイライブラリー ,  塩基配列 ,  大腸菌BL21(DE3) ,  蛋白質発現 ,  リフォールディング

分類 (3件)： 細菌による動物の伝染病  (FE02023A) ,  抗原・抗体・補体の生産と応用  (ED04030W) ,  微生物感染の生理と病原性  (EG03053T)

タイトルに関連する用語 (5件)： 組み換え ,  ラクダ ,  ドメイン ,  抗体 ,  研究