streptococcus equi subsp.Zooepidemicuにおける染色体組換え型の重複hasABCの構築

Lan Xiaoling; Zhang Bo; Li Xueru; Li Yao; Guo Tailin; Meng Tao; Ren Yaoyao; Jiang Nanping

文献

J-GLOBAL ID：201402275165329547 整理番号：13A1208088

streptococcus equi subsp.Zooepidemicuにおける染色体組換え型の重複hasABCの構築

Constructing duplication hasABC of chromosome recombinant in streptococcus equi subsp.zooepidemicu

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資料名：
巻： 52 号： 3 ページ： 396-401 発行年： 2012年
JST資料番号： C2382A ISSN： 0001-6209 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：中国 (CHN) 言語：中国語 (ZH)

[目的]streptococcus equi subsp.Zooepidemicuにおいて,温度感受性送達ベクターシステムpJR700.で,染色体組換え型の重複hasABCを構築することによって,ヒアルロン酸の収率を増加させる可能性を調査する。[方法]著者らは,PCRを用いてS.zooepidemicusのchromatosomeから,ヒアルロン酸合成酵素オペロンhasABC遺伝子の4147bp DNA断片を増幅した。このDNA断片をClaI部位でpJR700にサブクローニングして,組換えプラスミドpXL32を生じた。組換えプラスミドを,electroperationによってS.Zooepidemicusに形質転換した。細菌を37°Cで増殖することによって相同組換えを誘導し,形質転換体を3回のカナマイシン耐性によって選択した。次に培養液を移して,抗生物質なしで30°Cで4回増殖し,pJR700指示断片の削除を誘導した。THY寒天上で37°Cで培養することによってカナマイシン感受性のコロニーを選択した。S.ZooepidemicusのhasABC組換え型を,隣接領域に同種プライマーを用いて,RT-PCRを通して同定した。HA力価を修正カルバゾール分析によって測定した。[結果]著者らは,S.Zooepidemicusの染色体組換え型の重複hasABCを24時間のフラスコ培養で正常に構築した。重複hasABCを保菌している組換え型によるHA力価の生産は,野生型のそれより34%高かった。[結論]pJR700の温度感受性送達ベクターは,S.ZooepidemicusにおけるHAの収率を増加させるための連鎖球菌hasABC組換え型株を構築するために用いることができる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

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微生物の生化学 , 遺伝子操作 , 微生物,組織・細胞培養による物質生産一般

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