頚動脈血管形成術によるラットモデルにおける再狭窄におけるCGRP修飾された間充織幹細胞の役割【Powered by NICT】

Shi Bei; Chen Panke; Long Xianping; Zhao Ranzun; Deng Wenwen

文献

J-GLOBAL ID：201502204535334964 整理番号：15A1173846

頚動脈血管形成術によるラットモデルにおける再狭窄におけるCGRP修飾された間充織幹細胞の役割【Powered by NICT】

Role of CGRP modified mesenchymal stem cells in restenosis in rat model with carotid angioplasty

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資料名：
巻： 95 号： 20 ページ： 1619-1624 発行年： 2015年
JST資料番号： C2298A ISSN： 0376-2491 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：中国 (CHN) 言語：中国語 (ZH)

目的:血管平滑筋細胞( VSMCs)と再狭窄の増殖におけるカルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)の役割を探求すること。方法:高発現CGRPレンチウイルス[レンチ緑色蛍光蛋白質(GFP)-CGRP]を構築した。また間葉系幹細胞(MSCs)は,レンチGFP CGRP,レンチGFPとリン酸緩衝食塩水(PBS)でトランスフェクトした。逆転写ポリメラーゼ連鎖反応( RT-PCR)と酵素結合免疫吸着検定法(ELISA)は,それぞれ各群における平滑筋細胞のCGRP遺伝子と蛋白質発現レベルを決定するために用いた。MSCは,VSMCsと共培養した。実験群は,MSC~(CGRP+/+)+VSMC,MSC~(CGRP-/-)+VSMCとMSC~(PBS)+VSMCグループであった。メチルチアゾリルテトラゾリウム(MTT)法は平滑筋細胞の増殖を検出するために使用した。小嚢損傷アテローム性動脈硬化頚動脈は以前の研究に従って調製した。MSCはLv CGRP EGFPとLv CGRPをトランスフェクトし,その後ラットモデルに移植した。7日目の移植後では,損傷した頸動脈を採取しウェスタンブロットによるGRPのC発現および免疫蛍光によるCD31の発現を検出した。28日目の移植後では,損傷した頸動脈は,ヘマトキシリンおよびエオシン染色による組織形態を評価し,免疫組織化学的染色により増殖細胞核抗原(PCNA)の発現を検出するために収穫した。結果制御とレンチGFP群と比較して,CGRP蛋白質の発現とCGRP mRNAはレンチGFP CGRP(P<0. 05)トランスフェクション後72時間で増加した。VSMCsで72時間培養後,VSMCの増殖能力は,MSC~(CGRP+/+)+VSMC群と他の三群( P < 0. 05 )で最低であった。7日目の移植後では,制御とレンチGFP群と比較して,CGRP蛋白質の発現は,MSC CGRP群(P<0. 05)で有意に増加した。CD31の連続発現はMSCs CGRP群で損傷した頸動脈内膜,対照群ではそうではなかったのが分かった。28日目の移植後では,内膜過形成の面積は対照とレンチGFP群よりMSC CGRP群で小さかった。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】

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循環系の基礎医学 , 細胞生理一般

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