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J-GLOBAL ID：201502209334986132   整理番号：15A1123335

Sulfolobus tokodaiiからの熱安定性アミノペプチダーゼST1737のクローン,精製と特性化【Powered by NICT】

Clone, Purification and Characterization of Thermostable Aminopeptidase ST 1737 from Sulfolobus tokodaii

著者 (5件)： Yu Xiaoxiao (Jilin Univ. Key Lab. for Molecular Enzymology and Engineering of Ministry of Education, Changchun) ,  Hao Weiwei (Jilin Univ. Key Lab. for Molecular Enzymology and Engineering of Ministry of Education, Changchun) ,  Xie Guiqiu (Coll. of Pharmacy, Jilin Univ., Changchun) ,  Wang Yingwu (School of Life Sci., Jilin Univ., Changchun) ,  Gao Renjun (Jilin Univ. Key Lab. for Molecular Enzymology and Engineering of Ministry of Education, Changchun)
資料名： Chemical Research in Chinese Universities  (Chemical Research in Chinese Universities)
巻： 31  号： 1  ページ： 98-102  発行年： 2015年 
JST資料番号： W0630A  ISSN： 1005-9040  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 好熱性古細菌Sulfolobustokodaiiからアミノペプチダーゼ遺伝子をEscherichia coli BL21コドンプラス(DE3)でクローン化し,発現させた。アミノペプチダーゼを過剰発現するために,ベクターpET32aが構築され,標的遺伝子がヒスチジン標識及びチオレドキシン(Trx)遺伝子と融合させた。発現された蛋白質はエンテロキナーゼ(EK)をもつNi2+-カラム親和性クロマトグラフィー及びイオン交換クロマトグラフィーとクレフトを用いて精製した精製アミノペプチダーゼ(ST1737)を得た。発現ST1737の生化学的及び酵素的特性を特性化した。結果は,最適pHと温度はそれぞれ8と80°Cであることを示した。ST1737(0.2 mg/mL)の半減期は90°Cで約85hで,酵素は優れた熱安定性を示すことを示した。ST1737の活性は6.0から10.5に24時間のpH範囲での異なる緩衝液中25°Cでその治療後の85%以上を維持し,ST1737は中性またはわずかなアルカリ環境中で安定であることを示した。酵素は基質に対して高い活性,非修飾ペプチドAsp Alaなどを示したが,pNPC_8は最適エステラーゼ基質特異性を示した。これらの結果から,酵素は二機能性酵素であり,以前に報告されたアミノペプチダーゼと異なることを示す。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】

シソーラス用語： ベクター ,  *クローン ,  遺伝子 ,  塩基 ,  *キャラクタリゼーション ,  大腸菌 ,  *熱安定性 ,  基質 ,  酵素 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  *アミノペプチダーゼ
準シソーラス用語： 最適pH ,  標的遺伝子 ,  過剰発現 ,  *Sulfolobus tokodaii , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (6件)： Sulfolobus ,  熱安定性 ,  アミノペプチダーゼ ,  クローン ,  精製 ,  特性化