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J-GLOBAL ID：201502211842118469   整理番号：15A0935498

hsa-miR-128レンチウイルスベクターの構築及び神経膠腫細胞増殖への影響

著者 (8件)： FANG Dandong (第四軍医大学西京医院神経外科, 陝西, 西安) ,  LI Juntang (第四軍医大学免疫学教研室, 陝西, 西安) ,  YANG Tao (第四軍医大学免疫学教研室, 陝西, 西安) ,  ZHANG Leiming (海軍総院神経外科, 北京) ,  HUANGPU Luokai (第四軍医大学西京医院神経外科, 陝西, 西安) ,  WANG Xi (第四軍医大学西京医院神経外科, 陝西, 西安) ,  ZHANG Jianning (海軍総院神経外科, 北京) ,  YANG Angang (第四軍医大学免疫学教研室, 陝西, 西安)
資料名： Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi  (Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi)
巻： 28  号： 3  ページ： 247-250  発行年： 2012年 
JST資料番号： C2523A  ISSN： 1007-8738  CODEN： XFMZFM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:hsa-miR-128-1とhsa-miR-128-2前駆体を含むレンチウイルス発現ベクターを構築して、安定的目的遺伝子を発現する人神経膠腫U87細胞株を樹立する。hsa-miR-128は神経膠腫細胞増殖への影響を研究する。方法:hsa-miR-128前駆体を拡大して、Pentr3cベクターにクローンニングして、LR clonaseII酵素を用いて目的フラグメンドをトランスフォーメーションしPlenti6.3プラスミド作製し、ウイルスをパッケージングして、構築したPlenti6.3-mCherryベクターパッケージングしたウイルスを対照として人神経膠腫U87細胞を感染させて、Blasticidinにて安定的抗生物質抗性を発現する細胞株を選別した。蛍光顕微鏡にてmCherryの蛍光発現を観察して、リアルタイム蛍光定量にてmiR-128の発現量を測定して、フローサイトメトリにて細胞周期を測定して、MTTにて細胞増殖を測定する。結果:成功的に組換えレンチウイルスベクターPlenti6.3-miR-128-1とPlenti6.3-miR-128-2を構築した。Blasticidinにて細胞株を選別し、mCherry蛍光発現とリアルタイム蛍光定量PCRの確認によって、成功的にレンチウイルスパッケージングした。ウイルス力価は1.1×107-8.3×107TU/mLの間で、細胞周期とMTT結果もmiR-128-1とmiR-128-2高発現しているU87細胞株が細胞増殖抑制を示した。結論:成功的にそれぞれ二種類のhsa-miR-128前駆体を含むレンチウイルス発現ベクターを構築した。安定的発現するhsa-miR-128的U87細胞株を選別した。miR-128-1とmiR-128-2は神経膠腫U87細胞増殖を抑制する。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： プラスミド ,  組換 ,  フローサイトメトリー ,  遺伝子 ,  *細胞増殖 ,  細胞周期 ,  *ウイルス ,  *神経膠腫 ,  *ベクター ,  *レンチウイルス
準シソーラス用語： 発現 ,  細胞株 ,  U87細胞 ,  発現ベクター ,  *レンチウイルスベクター , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (2件)： 細胞生理一般  (EF02010S) ,  遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (5件)： HSA ,  レンチウイルスベクター ,  構築 ,  神経膠腫 ,  細胞増殖