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J-GLOBAL ID：201502214732913920   整理番号：15A1099247

ブタ日本脳炎ウイルスのDNAレプリコンベクターの構築と外来遺伝子発現解析の応用【Powered by NICT】

Construction of DNA Replicon Vector of Swine Japanese Encephalitis Virus and Application of Exogenous Gene Expression Analysis

著者 (7件)： Wang Xiaodu (Coll. of Animal Sci. and Technol.,ZhejiangA & F Univ., Lin’an) ,  Zhao Fanfan (Coll. of Animal Sci. and Technol.,ZhejiangA & F Univ., Lin’an) ,  Dai Bing (Coll. of Animal Sci. and Technol.,ZhejiangA & F Univ., Lin’an) ,  Shao Donghua (Shanghai Veterinary Res. Inst.,Chinese Acad. of Agricultural Sciences, Shanghai) ,  Jiang Chunying (Shanghai Veterinary Res. Inst.,Chinese Acad. of Agricultural Sciences, Shanghai) ,  Zhou Qi (Coll. of Animal Sci. and Technol.,ZhejiangA & F Univ., Lin’an) ,  Ma Zhiyong (Shanghai Veterinary Res. Inst.,Chinese Acad. of Agricultural Sciences, Shanghai)
資料名： Xumu Shouyi Xuebao  (Xumu Shouyi Xuebao)
巻： 46  号： 1  ページ： 111-118  発行年： 2015年 
JST資料番号： C2231A  ISSN： 0366-6964  CODEN： CMHPAI  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： ブタ日本脳炎ウイルス(JEV)は雌ブタ流産を引き起こす病原体の一つである。本実験では,DNAレプリコンベクターを構築し,外来遺伝子を発現させた。JEV SA14-14-2配列に基づいて,E遺伝子配列のウイルス構造蛋白質をコードする遺伝子prMand部品は変異体PCR法,非構造蛋白質遺伝子と非コード領域配列,サブゲノムレプリコンpAC JEV挿入FMDV2AとH DVリボザイム配列を構築したことを保持するによって除去された。自己複製の能力を明らかにするために,非構造蛋白質(NS3)の発現は,ウェスタンブロット法と間接免疫蛍光分析により検出した。結果はNS3蛋白質レベルはトランスフェクション時間の延長と共に徐々に増加することを示した。外来蛋白質を発現する約JEVレプリコン能力を調べるために,著者らは,ブタ繁殖・呼吸障害症候群ウイルスpAC JEV(pAC-JEV-EGFP,pAC-JEV-HA,pAC-JEV-GP5)の多重クローニング部位への増強緑色蛍光蛋白質(EGFP)遺伝子,ブタインフルエンザウイルスのHA遺伝子とGP5遺伝子を挿入し,NS5遺伝子の変異が欠失した(pAC-JEV-ΔNS5)。プラスミドは,BHK-21細胞にトランスフェクトした,EGFPm RNAレベルは48,72,96hin pAC JEV EGFPbyリアルタイムPCRで有意に増加したが,EGFP蛍光を直接12時間で蛍光顕微鏡により検出され,EGFP蛍光信号は8日間持続した。ブタインフルエンザウイルスとGP5ブタ繁殖・呼吸障害症候群ウイルスのHAはウェスタンブロット法によるマウス抗HAとGP5抗体を用いて検出した。結果はHAとGP5は,BHK-21細胞で発現していることを示した。JEVサブゲノムレプリコンpAC JEVは細胞蛋白質とJEV遺伝子機能とウイルス蛋白質相互作用を研究するために使用できるDNAワクチン研究のための貴重なツールである。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】

シソーラス用語： 突然変異体 ,  プラスミド ,  *レプリコン ,  タンパク質 ,  *ウイルス ,  *遺伝子 ,  *ブタ
準シソーラス用語： BHK-21細胞 ,  HA遺伝子 ,  EGFP ,  クローニング ,  ブタ繁殖呼吸障害症候群ウイルス ,  非翻訳領域 ,  遺伝子配列 ,  *外来遺伝子 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 遺伝子の構造と化学  (EC02020U)

タイトルに関連する用語 (7件)： ブタ ,  日本脳炎ウイルス ,  DNA ,  構築 ,  外来 ,  遺伝子発現解析 ,  応用