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J-GLOBAL ID:201502218034759311   整理番号:15A1170444

Geobacillus stearothermophilusとの共培養のSymbiobacterium thermophilumにおけるトリプトファナーゼ発現の分析

Analysis of the tryptophanase expression in Symbiobacterium thermophilum in a coculture with Geobacillus stearothermophilus
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巻: 98  号: 24  ページ: 10177-10186  発行年: 2014年12月 
JST資料番号: H0764A  ISSN: 0175-7598  CODEN: EJABDD  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: ドイツ (DEU)  言語: 英語 (EN)
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トリプトファナーゼ陽性Symbiobacterium thermophilumはGeobacillus stearothermophilusとの共培養で効率的に増殖する自由生活共生細菌である。本研究では,S.thermophilum増殖はG.stearothermophilusの先例増殖によって確立された高CO2および低O2状態に依存することを示している。高CO2を含む無酸素大気の使用はS.thermophilumがG.stearothermophilusと無関係に増殖するのを許すが,細胞収率は共培養で達成されるよりも10倍低い。本研究では,S.thermophilumにおいて共培養依存的発現およびトリプトファナーゼの活性を特性化した。S.thermophilum細胞はG.stearothermophilusとの共培養では顕著な量のインドールを蓄積したが,細菌の純粋培養ではトリプトファンの添加に関係なく蓄積しなかった。S.thermophilum細胞は馴化培地(G.stearothermophilusの培養上清を供給された培地)からなる純粋培養でインドールを蓄積した。プロテオーム解析により,馴化培地で増殖したS.thermophilum細胞で特異的に産生した蛋白質を同定したが,そしてそれはtna2〈STH439)によってコードされるトリプトファナーゼであった。G.stearothermophilusの培養上清からトリプトファナーゼ誘導成分を分離しようとする試みは失敗に終わったが,10mM重炭酸塩を培地に添加された場合,インドール蓄積が生じることを見出した。RT-PCR法により,重炭酸塩の添加はtna2の転写を刺戟することを示した。tna2プロモーター内で確認された転写開始部位は,別のσ因子,σ54により指定された-24および-12共通配列によって先行された。証拠により,アミノ酸代謝に関与するいくつかの遺伝子の転写はσ54遺伝的であり,PASドメインを含む細菌エンハンサ結合蛋白質は高濃度の重炭酸塩の存在下転写を調節することを示唆した。Copyright 2014 Springer-Verlag Berlin Heidelberg Translated from English into Japanese by JST.
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