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J-GLOBAL ID：201502220418589760   整理番号：15A1176230

Saccharina japonicaの核ゲノムcbbX遺伝子の原核生物発現と精製【Powered by NICT】

Prokaryotic Expression and Purification of Nulear-genomic cbbX Gene of Saccharina japonica

著者 (3件)： Xie Weiyi (Coll. of Fisheries and Life Sci.,Shanghai Ocean Univ., Shanghai) ,  Bi Yanhui (Coll. of Fisheries and Life Sci.,Shanghai Ocean Univ., Shanghai) ,  Zhou Zhigang (Coll. of Fisheries and Life Sci.,Shanghai Ocean Univ., Shanghai)
資料名： Huabei Nongxuebao  (Huabei Nongxuebao)
巻： 30  号： 2  ページ： 64-71  発行年： 2015年 
JST資料番号： C2462A  ISSN： 1000-7091  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： カルビンBenson bassham周期関連酵素(CbbX)はChromophytaにおけるRubiscoを活性化するred-like Rubiscoアクチバーゼと見なされている。Saccharina japonicaでは,cbbX遺伝子は核ゲノム(nuccbbX)と色素体ゲノム(ptcbbX)にコードされている。RT-PCRにより,nuccbbX遺伝子と制限酵素切断部位のフラグメントを含む完全なORFは本研究で増幅した。Rhodobacter sphaeroides(RsCbbX)のnucCbbXの蛋白質配列,S.japonicaのptCbbXとCbbX実施多重配列アラインメントは予想される成熟nucCbbXはCbbX関数(ATPアーゼ,RuBP結合と保持六量体構造安定性)に関連したAAA+domain,Walker AおよびBモチーフと残基を含んでいた明らかにした。nucCbbXとptCbbX,nucCbbXとRsCbbX間のペアワイズ配列類似性は37.4%と36.8%であった。がptCbbXとRsCbbX間の類似性は比較的高い57.6%であった。nucCbbXの予測された3D構造は一つのα-ヘリックス,5αhelixsと5β垢を含むα/βサブドメイン,及びC末端5ヘリックス束サブドメインから成るN末端伸長した三サブドメインを含んでいた。さらなる研究のためにnucCbbXの結晶構造,標的フラグメントを高速ベクターpET28aにサブクローニングすることに成功し,1%IPTGにより誘導されたE.coli BL21(DE3)で発現させた。SDS-PAGEの結果は,融合蛋白質が主にnucCbbX成熟蛋白質44.7kDaのそれより大きい分子量50.2kDaの封入体の形で発現することを示した。融合蛋白質は尿素による変性後に精製した。また精製蛋白質は再生後の蛋白質結晶化に用いることができることを証明した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】

シソーラス用語： 融合タンパク質 ,  RT-PCR法 ,  *ゲノム ,  ベクター ,  類似性 ,  タンパク質 ,  *遺伝子 ,  リブロースビスリン酸カルボキシラーゼ ,  封入体 ,  フラグメント ,  SDS-PAGE ,  ウレア化合物 ,  ガラクトシド ,  チオ糖 ,  ピラノシド ,  有機硫黄化合物
準シソーラス用語： C末端 ,  *原核生物発現 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J)

物質索引 (2件)： 尿素 ,  イソプロピルチオガラクトシド

タイトルに関連する用語 (5件)： Saccharina ,  核 ,  ゲノム ,  原核生物発現 ,  精製