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J-GLOBAL ID：201502221127081316   整理番号：15A1014044

活動する逆転写酵素:実時間フリッピングおよびポリメラーゼ活性モニタリングのためのFRETに基づくアッセイ

Reverse Transcriptase in Action: FRET-Based Assay for Monitoring Flipping and Polymerase Activity in Real Time

著者 (7件)： SHARMA K. K. (Univ. de Strasbourg, Illkirch, FRA) ,  PRZYBILLA F. (Univ. de Strasbourg, Illkirch, FRA) ,  RESTLE T. (Univ. zu Luebeck, Schleswig-Holstein, DEU) ,  BOUDIER C. (Univ. de Strasbourg, Illkirch, FRA) ,  GODET J. (Univ. de Strasbourg, Illkirch, FRA) ,  GODET J. (Hopitaux Universitaires de Strasbourg, Strasbourg, FRA) ,  MELY Y. (Univ. de Strasbourg, Illkirch, FRA)
資料名： Analytical Chemistry  (Analytical Chemistry)
巻： 87  号： 15  ページ： 7690-7697  発行年： 2015年08月04日 
JST資料番号： A0395A  ISSN： 0003-2700  CODEN： ANCHAM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ヒト免疫不全ウイルスタイプ1(HIV-1)は,AIDSの原因ウイルスである。HIV-1の複製サイクル時,(+)鎖ウイルスRNAゲノムはHIV-1がコードする逆転写酵素(RT)により逆転写され,インテグレーション活性二重鎖RNAを形成する。本論文は,単一分子実験で開発したFRETベースの戦略が従来のアンサンブル蛍光技術を使用し,その基質上のRTの方向およびダイナミクス,およびRTポリメラーゼ活性に感受性な,簡単で,実時間スクリーニングアッセイを設計することを目的とした。この方法は蛍光シグナルおよび速度論の差異の逆の変化を通してRTの方向およびプライマー伸長の変化の両者をモニターできる,簡単な1段階で,ワンポットな方法である。また,多くのヌクレオシド(RRTIs)および非ヌクレオシドRT阻害剤(NNRTIs)を容易に分別できる。

シソーラス用語： *蛍光共鳴エネルギー移動 ,  *逆転写酵素 ,  酵素阻害剤 ,  二本鎖RNA ,  プライマー【遺伝】 ,  蛍光分析 ,  スクリーニング ,  計測
準シソーラス用語： *FRET【移動】 ,  インテグレーション ,  ハイスループットスクリーニング ,  逆転写酵素阻害剤 ,  実時間計測

分類 (2件)： 分光分析  (CC03012W) ,  酵素製剤・酵素阻害剤の基礎研究  (GW21010W)

タイトルに関連する用語 (7件)： 活動 ,  転写酵素 ,  実時間 ,  活性 ,  モニタリング ,  FRET ,  アッセイ