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J-GLOBAL ID:201502244859663538   整理番号:15A0090393

大腸菌と標的蛋白質精製におけるBupleurum chinense DC.とその発現からのグリコシルトランスフェラーゼBcUGT1の発現解析【Powered by NICT】

Expression analysis of glycosyltransferase BcUGT1 from Bupleurum chinense DC. and its expression in E. coli and the target protein purification
著者 (9件):
資料名:
巻: 48  号:ページ: 1345-1352  発行年: 2013年 
JST資料番号: C2527A  ISSN: 0513-4870  CODEN: YHHPAL  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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グリコシルトランスフェラーゼ遺伝子BcUGT1Bupleurum chinense DCからクローン化したのORF配列を解析し,その三次元構造を予測した。qRT-PCR法を用いて,メチルジャスモン酸(MeJA)誘導後,異なる植物組織におけるBcUGT1の発現特性を調べた。結果はBcUGT1はB.chinenseのサイコサポニン生合成に関与する可能性があることを示した。その後,BcUGT1の組換えベクターは大腸菌での発現のために構築した。標的蛋白質を成功裏に発現させ,精製した。本研究では,三個のベクトル,pRSET-A,pET-28a(+)及びpET-30a(+),およびE.coli BL21(DE3)pLysS,BL21A1とBL21-CodonPlus(DE3)-RIPLの三分離株は異なる誘導条件下,種々の濃度のような下および誘導剤(L-アラビノースとIPTG)と異なる誘導温度の時間中に用いた。結果は0.5または1mmol・L-1~(1)IPTG,16°C,20時間の条件では,標的蛋白質をベクターとしてpET-28a(+)またはpET-30a(+)とBL21-CodonPlus(DE3)-RIPLで発現していることを示した。PrepEase~His標識蛋白質精製キットを用いて,標的蛋白質を精製した。BcUGT1の追跡生体機能解析に役立つであろう。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】
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生薬一般 

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