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J-GLOBAL ID：201502247354769560   整理番号：15A0215931

安定同位体標識コラーゲンのプロテイナーゼ消化物を用いた血液中ヒドロキシプロリン含有ペプチドの高度に正確な定量

Highly Accurate Quantification of Hydroxyproline-Containing Peptides in Blood Using a Protease Digest of Stable Isotope-Labeled Collagen

著者 (4件)： TAGA Yuki (Nippi Res. Inst. of Biomatrix, Ibaraki, JPN) ,  KUSUBATA Masashi (Nippi Res. Inst. of Biomatrix, Ibaraki, JPN) ,  OGAWA-GOTO Kiyoko (Nippi Res. Inst. of Biomatrix, Ibaraki, JPN) ,  HATTORI Shunji (Nippi Res. Inst. of Biomatrix, Ibaraki, JPN)
資料名： Journal of Agricultural and Food Chemistry  (Journal of Agricultural and Food Chemistry)
巻： 62  号： 50  ページ： 12096-12102  発行年： 2014年12月17日 
JST資料番号： C0251A  ISSN： 0021-8561  CODEN： JAFCAU  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 体内蛋白質分解類似のトリプシン/キモトリプシン及び透析血漿による消化を,内標として安定同位体標識コラーゲン(SI-コラーゲン)を用い,血液中のHyp及び13種Hyp含有ジ及びトリペプチドをLC-MSで定量する方法を開発した。ヒト試験では25gの魚ゼラチン加水分解物を経口摂取後,6hまで血液試料を採取した。SI-コラーゲンはHEL細胞の¹³C₆-Lys,¹³C₆¹⁵N₄-Arg及び¹³C₅¹⁵N¹-Proによる培養で調製した。ウシI型コラーゲンからのHyp含有ペプチドの生成はトリプシン及び/或いはキモトリプシン消化後血漿プロテイナーゼ消化により劇的に増加した。人血中の生成Hyp含有ペプチド量は6hまでで,Pro-Hyp-Glyの0.663nmol/mL・hからPro-Hypの163nmol/mL・hまでの範囲にあり,Pro-Hypの量が他のHyp含有ペプチドより多かった。本法の3試行によるCVはGlu-Hyp-Gly以外<7%であった。SI-消化法により,従来報告のないHyp-含有ペプチドのGlu-Hyp,Ser-Hyp及びGlu-Hyp-Glyを検出した。本法は経口摂取ゼラチン加水分解物の吸収代謝及び機能性ゼラチン加水分解物の開発に有用である。

シソーラス用語： *コラーゲン ,  *標識法 ,  安定同位体 ,  プロテイナーゼ ,  分解物 ,  *ペプチド ,  *血中濃度 ,  *定量分析 ,  トリプシン ,  キモトリプシン ,  LC-MS分析 ,  腫瘍細胞 ,  培養細胞 ,  細胞培養 ,  NMR【磁気共鳴】 ,  アミノ酸 ,  窒素複素環化合物 ,  ヒドロキシ酸
準シソーラス用語： HEL細胞 ,  安定同位体標識法 ,  酵素分解物

分類 (2件)： 蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N) ,  血液検査  (GC02050D)

物質索引 (1件)： ヒドロキシプロリン

タイトルに関連する用語 (8件)： 安定同位体標識 ,  コラーゲン ,  プロテイナーゼ ,  消化 ,  血液 ,  ヒドロキシプロリン ,  ペプチド ,  定量