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J-GLOBAL ID：201502261969277406   整理番号：15A0025465

Toxoplasma gondiiのマラートデヒドロゲナーゼ遺伝子のクローニング,発現および免疫原性解析【Powered by NICT】

Cloning, Expression and Immunogenicity Analysis of Malate Dehydrogenase Gene of Toxoplasma gondii

著者 (7件)： Liu Zhuanzhuan (Dep. of Microbiology and Immunology, Xuzhou Medical Coll., Xuzhou) ,  Yang Yanping (Dep. of Microbiology and Immunology, Xuzhou Medical Coll., Xuzhou) ,  Yin Guorong (Dep. of Parasitology, Shanxi Medical Univ., Taiyuan) ,  Wang Hailong (Dep. of Parasitology, Shanxi Medical Univ., Taiyuan) ,  Li Yaqing (Dep. of Parasitology, Shanxi Medical Univ., Taiyuan) ,  Zhu Jianjiang (Dep. of Parasitology, Shanxi Medical Univ., Taiyuan) ,  Liu Yisheng (Dep. of Microbiology and Immunology, Xuzhou Medical Coll., Xuzhou)
資料名： Zhongguo Jishengchongxue yu Jishengchongbing Zazhi  (Zhongguo Jishengchongxue yu Jishengchongbing Zazhi)
巻： 31  号： 1  ページ： 12-16  発行年： 2013年 
JST資料番号： C2242A  ISSN： 1000-7423  CODEN： ZJYZET  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： Toxoplasma gondiiのマラートデヒドロゲナーゼ(MDH)遺伝子をクローニングおよび発現し,免疫原性を解析すること。方法全RNAをT.gondii(GenBank登録No.AY650028)のRH株のタキゾイトから抽出した。TgMDHのコード領域は対の特異的プライマーで増幅した。RT-PCRの生成物は二重制限酵素で消化し,pET30a(+)ベクターに連結した。組換えpET30a(+)-TgMDHプラスミドをE.coli DH5aに変換した。陽性クローンは二重制限酵素消化,PCRおよび配列決定により確認した。正しいプラスミドを大腸菌BL21に変換し,IPTGにより誘導された。発現タンパク質は,SDS-PAGEにより分析した。発現条件を最適化した。豊富な可溶性rTgMDH蛋白質をNi-NTA親和性クロマトグラフィーで精製した。マウス鼻腔内精製rTgMDHで免疫し,マウス抗rTgMDH血清を調製した。マウス抗rTgMDH血清とウサギ抗T.gondii血清を用いたウエスタンブロットは,その免疫原性を解析するために用いた。結果はRT-PCRの生成物は,951bpであった。組換えプラスミドpET30a(+)-TgMDHは二重制限酵素消化,PCRおよび配列決定により確認した。相対分子量36~000の可溶性組換え蛋白質はSDS-PAGE,続いてcoomassieブルー染色により解析したウェスタンブロット法により,rTgMDHはマウス抗rTgMDH血清とウサギ抗Tによって認識されることを明らかにし.gondii血清結論TgMDH遺伝子を原核生物発現系で発現し,免疫原性を示した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】

シソーラス用語： *遺伝子 ,  *免疫原性 ,  RT-PCR法 ,  DNA制限酵素 ,  ベクター ,  組換 ,  プラスミド ,  酵素的分解 ,  PCR法 ,  SDS-PAGE ,  可溶性 ,  *免疫 ,  血清 ,  組換タンパク質 ,  溶解性
準シソーラス用語： *発現 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (2件)： 抗原・抗体・補体一般  (ED04010A) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (6件)： Toxoplasma ,  遺伝子 ,  クローニング ,  発現 ,  免疫原性 ,  解析