文献

J-GLOBAL ID：201502266353518517   整理番号：15A0047231

デングウイルスの構築ほ乳類ディスプレイ技術による特異的完全長完全ヒト抗体ライブラリー【Powered by NICT】

Construction of dengue virus- specific full- length fully human antibody libraries by mammalian display technology

著者 (10件)： Wen Yangming (Dep. of Microbiology,School of Public Health and Tropical Medicine,Southern Medical Univ., Guangzhou) ,  Lan Kaijian (Nanfang Hospital,Southern Medical Univ., Guangzhou) ,  Wang Junjie (Nanfang Hospital,Southern Medical Univ., Guangzhou) ,  Yu Jingyi (Dep. of Microbiology,School of Public Health and Tropical Medicine,Southern Medical Univ., Guangzhou) ,  Qu Yarong (Dep. of Microbiology,School of Public Health and Tropical Medicine,Southern Medical Univ., Guangzhou) ,  Zhao Wei (Dep. of Microbiology,School of Public Health and Tropical Medicine,Southern Medical Univ., Guangzhou) ,  Zhang Fuchun (Guangzhou 8th People’s Hospital, Guangzhou) ,  Tan Wanlong (Nanfang Hospital,Southern Medical Univ., Guangzhou) ,  Cao Hong (Dep. of Microbiology,School of Public Health and Tropical Medicine,Southern Medical Univ., Guangzhou) ,  Zhou Chen (School of Chinese Medicine Southern Medical Univ., Guangzhou)
資料名： Nanfang Yike Daxue Xuebao  (Nanfang Yike Daxue Xuebao)
巻： 33  号： 6  ページ： 847-852  発行年： 2013年 
JST資料番号： C2216A  ISSN： 1673-4254  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的はデングウイルス-哺乳類cellsurfaceディスプレイ法を用いて特定の全長完全ヒト抗体ライブラリーを構築した。方法全RNAをデング熱と末梢血単核細胞(PBMC)fromconvalescent患者から抽出した。軽鎖と重鎖可変領域(LCκとVH)の抗体遺伝子の貯蔵所をRT-PCRにより増幅し,lightchainと重鎖ライブラリーを構築するために別々にベクトルpDGB HC TMに挿入した。ライブラリーDNAはCHO細胞にトランスフェクトし,CHO細胞表面上の完全長さfullyhuman抗体の発現をフローサイトメトリーで分析した。Resluts1.2を用いてμgの全RNAを鋳型としてPBMCをisolatedfrom,LCκ及びVHを増幅し,完全長さ完全ヒト抗体mammaliandisplayライブラリーを構築した。カッパ軽鎖遺伝子ライブラリーは,1.45×104のサイズを有し,重鎖遺伝子は1.8×10~5のサイズをlibraryhad。配列分析から,10の軽鎖クローンのうち8と構築したライブラリーからピックアップ10重鎖clonesrandomly中7は正確なオープンリーディングフレームを含んでいた。FACS分析は,正確なオープンリーディングフレーム15クローンは全長抗体,CHO cellsurfacesに検出を発現thatall示した。重鎖と軽鎖遺伝子ライブラリーCHO細胞への共トランスフェクション後,CHO細胞表面上の完全なlengthantibodiesの発現は表現多様性抗体libraryreaching1.46×10~9の[(1.45×10~4×80%)×(1.8×10~5×70%)]とFACS分析により検出することができた。結論デングウイルスに対するヒト抗体ライブラリーをテンプレート,LCκ及びVH fulllengthfullyとして1.2μgの全RNAを用いては表現多様性of109の作成に成功した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】

シソーラス用語： 哺乳類 ,  軽鎖 ,  重鎖 ,  RT-PCR法 ,  *ライブラリ【計算機】 ,  DNA【核酸】 ,  CHO細胞 ,  フローサイトメトリー ,  銅 ,  遺伝子ライブラリー ,  クローン ,  トランスフェクション
準シソーラス用語： *デングウイルス ,  *抗体ライブラリー ,  FACS , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 腫ようの化学・生化学・病理学  (GE02030N)

タイトルに関連する用語 (6件)： デングウイルス ,  構築 ,  ほ乳類 ,  ディスプレイ ,  ヒト ,  抗体ライブラリー