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J-GLOBAL ID:201502281757057415   整理番号:15A0057406

新規遺伝子MGTの試験16を含むretrovirolベクタの構築とマウス間葉系幹細胞におけるその発現【Powered by NICT】

Construction of retrovirol vector containing novel gene mgt-16 and its expression in mouse mesenchymal stem cells
著者 (6件):
資料名:
巻: 35  号:ページ: 447-451  発行年: 2014年 
JST資料番号: C2220A  ISSN: 0258-879X  CODEN: DJXUE5  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的新規遺伝子mgt16を有するレトロウイルスベクターを構築し,マウス新規遺伝子mgt16を含むマウス間葉系幹細胞C3H/10T1/2(10T1/2)法DNA配列におけるその発現を検討することは完全長mgt16c DNAのPCR増幅のための鋳型として用いた。DNA断片はpEGFP-N1ベクターにクローンpMD18Tプラスミドと配列決定によるT-Aクローニング後pEGFP N1 16ベクトルを生成した。pEGFP N1 16ベクトルはPCR,制限酵素消化および配列決定解析により確認した。レトロウイルスベクター,pLEGFP N1 16,mgt16遺伝子を含むレトロウイルスベクター,pLEGFP N1,pEGFP N1 16ベクターを用いて構築した。pLEGFP N1 16ベクターは制限酵素消化により検証し,配列決定し,次にパッケージング細胞株フェニックスにトランスフェクトしたEGFP融合mgt16レトロウイルス粒子,収集し,10T1/2細胞に感染するために用いるを調製した。G418(400 μg/mL)連続選択はEGFP融合mgt16を過剰発現する安定10T1/2細胞クローンを得るために実施した。蛍光顕微鏡は,Phoenixと10T1/2細胞におけるMGT16の発現と細胞内局在性を決定した。結果は約300bpサイズのバンドはmgt16遺伝子のためのPCR増幅後アガロースゲル電気泳動により観察し,配列決定の結果は,T-Aクローンにおける挿入断片の配列は,GenBankで報告されているmgt16遺伝子と同一であったことを示した。PCR,制限酵素消化と配列決定はpEGFP N1 16プラスミドを構築することに成功したことを明らかにした。制限酵素消化と配列決定はpLEGFP N1 16プラスミドも成功裏に構築したことを明らかにした。MGT16を過剰発現するPhoenixと10T1/2細胞は細胞質における緑色蛍光分布,特に核周辺領域周辺のを示した。結論著者らは新規遺伝子,mgt16を運ぶ組換えレトロウイルスベクターを構築することに成功し,マウス間葉系幹細胞,間葉系幹細胞における新規遺伝子mgt16の役割を研究するための基礎を提供する,を発現した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】
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, 【Automatic Indexing@JST】
分類 (4件):
分類
JSTが定めた文献の分類名称とコードです
遺伝子操作  ,  腫ようの化学・生化学・病理学  ,  分子遺伝学一般  ,  遺伝子発現 

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