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J-GLOBAL ID：201502286723972485   整理番号：15A0030198

マイクロRNA-21の構築とPTEN真核生物発現と低分子ヘアピン型RNA発現ベクター【Powered by NICT】

Construction of microRNA-21 and PTEN Eukaryotic Expression and Short Hairpin RNA Expression Vectors

著者 (6件)： Wu Yiying (Dep. of Pharmacology, West China Center of Medical Sciences, Sichuan Univ., Chengdu) ,  Zhang Yuanyuan (Dep. of Pharmacology, West China Center of Medical Sciences, Sichuan Univ., Chengdu) ,  Wan Lihong (Dep. of Pharmacology, West China Center of Medical Sciences, Sichuan Univ., Chengdu) ,  Chen Jian (Dep. of Pharmacology, West China Center of Medical Sciences, Sichuan Univ., Chengdu) ,  Zhou Liming (Dep. of Pharmacology, West China Center of Medical Sciences, Sichuan Univ., Chengdu) ,  Wang Xiaodong (Gastrointestinal Surgery Center, West China Hospital of Sichuan Univ., Chengdu)
資料名： Shengwu Yixue Gongchengxue Zazhi  (Shengwu Yixue Gongchengxue Zazhi)
巻： 30  号： 2  ページ： 359-364  発行年： 2013年 
JST資料番号： C2182A  ISSN： 1001-5515  CODEN： SYGZF2  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 本研究の目的は,microRNA-21とホスファターゼおよびテンシンホモログ染色体十(PTEN)で欠失したの組換え真核生物発現と短ヘアピンRNA(shRNA)発現ベクターを構築することである。microRNA-21とPTENの遺伝子配列によると,一本鎖siRNAオリゴヌクレオチド及びPCRプライマーの二対を設計し,合成した。アニーリング後,二本鎖DNAオリゴヌクレオチドはベクトルPsilencer4.1CMVにクローニングした。pre-miR-21とPTENをコードする遺伝子配列をRT-PCRにより大腸癌細胞HCT-116から増幅した。PCR生成物は,制限エンドヌクレアーゼ酵素で消化し,ベクターpEGFP-N1へクローン化した。構築した組換えベクターは制限消化とDNA配列分析により同定した。陽性クローンは,二重酵素消化により確認し,酵素断片をベクターと目的遺伝子配列と一致した。DNA配列決定は,目的のオリゴヌクレオチド断片を真核生物発現プラスミドに挿入されたことを確認した。microRNA-21とPTEN真核生物発現およびshRNA発現ベクターを構築し,ヒトcolorectalcancerにmiR-21の影響に関する更なる研究の基礎を提供することに成功したと結論することができた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】

シソーラス用語： *真核生物 ,  染色体 ,  組換 ,  siRNA ,  オリゴヌクレオチド ,  RT-PCR法 ,  PCR法 ,  DNA制限酵素 ,  *ベクター ,  クローン
準シソーラス用語： *PTEN ,  *発現 ,  *発現ベクター ,  遺伝子配列 ,  DNA配列 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (7件)： マイクロRNA-21 ,  構築 ,  PTEN ,  真核生物 ,  発現 ,  低分子ヘアピン型RNA ,  発現ベクター