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J-GLOBAL ID:201502291644392396   整理番号:15A0089191

ヒトメラノーマ細胞株A375細胞におけるアポトーシスと細胞周期に対するマイクロRNA-21とマイクロRNA494,の影響【Powered by NICT】

Effect of microRNA-21 and microRNA-494 on cell cycle of and apoptosis in a human melanoma cell line A375
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巻: 46  号: 10  ページ: 719-722  発行年: 2013年 
JST資料番号: C2321A  ISSN: 0412-4030  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的ミクロRNA-21(miR-21)阻害剤とA375ヒト黒色腫細胞のトランスフェクションのためのmiR-494模倣体の濃度を最適化するために,miR-21inbihitorとmiR-494の効果を推定するためには,A375細胞の増殖に対する模倣する。方法A miR-21inbihitorとmiR-494模倣体を設計し,構築した。トランスフェクションのためのmiR-21inbihitorとmiR-494模倣体の濃度を最適化するために,inbihitorと模倣体の六種の濃度(70 - 250nmol/L)は,リポフェクタミン~(TM)2000を用いて,別々にA375細胞にトランスフェクトした。,定量的蛍光PCRはA375細胞におけるmiR-21とmiR-494の発現を決定するために行った。A375細胞を五群に分類した:miR-21阻害剤トランスフェクトした残りの非トランスフェクト,miR-21阻害剤群Mockブランク対照群,miR-21阻害剤陰性対照をトランスフェクトしたmiR-21対照群,miR-494模倣群miR-494模倣体を形質移入した,miR-494模倣陰性対照をトランスフェクトしたmiR-494対照群。別の48時間培養後,細胞をフローサイトメトリーを用いて細胞アポトーシスとサイクルの分析のために収集した。一方,Cy5標識miR-494模倣負制御は,倒立蛍光顕微鏡を用いたトランスフェクション効率の評価のためのA375細胞にトランスフェクトした。結果miRNAはA375細胞から成功裏に抽出された。定量的PCRで明らかになったように,120nmol/LでmiR-21阻害剤トランスフェクトしたA375細胞はmiR-21(平均:0.80;範囲:0.65 - 0.92)の最低発現量(2~(-ΔΔCt))を示し,250nmol/LでmiR-494模倣体を形質移入したものはmiR-494(平均:126.82;範囲:111.52 - 144.22)の最高の発現レベルを示した。A375細胞におけるトランスフェクション効率は90%以上であった。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】
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分類 (1件):
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皮膚の腫よう 

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