特許
J-GLOBAL ID:201503002466280417
組織切片中の単一細胞におけるマーカー定量
発明者:
,
,
,
,
,
出願人/特許権者:
代理人 (5件):
瀧野 秀雄
, 川崎 隆夫
, 瀧野 文雄
, 津田 俊明
, 鳥野 正司
公報種別:公表公報
出願番号(国際出願番号):特願2015-518582
公開番号(公開出願番号):特表2015-525358
出願日: 2013年06月20日
公開日(公表日): 2015年09月03日
要約:
個々の細胞タンパク質の発現、ならびに単一細胞レベルでの及び臨床組織試料の切片にわたりマップされた1細胞当たりの個々の細胞タンパク質分子数に関する不均一性の定量を可能とする単一細胞に基づく画像解析を組み込む改良されたアッセイが開示される。
請求項(抜粋):
組織試料の切片中の細胞タンパク質の定量された密度分布の少なくとも二次元(例えば、長さ及び幅)のマップを得るため、前記組織試料の切片における複数の細胞の各々の前記細胞タンパク質のレベルを定量的に計測する方法であって、前記方法が、
組織試料から切片を調製する工程であって、前記切片が識別可能な細胞を含む工程、
前記細胞タンパク質に特異的な第1染色、細胞核に特異的な第2染色、及び標的細胞と非標的細胞とを識別することを可能とする第3染色により前記切片を染色する工程であって、前記染色された切片を画像化する場合に前記第1染色、前記第2染色及び前記第3染色が互いに識別可能である工程、
前記切片の1以上の顕微鏡画像を得る工程であって、前記第1染色、前記第2染色及び前記第3染色を識別し得る工程、
前記第2染色及び前記第3染色による染色に基づいて前記1以上の画像内の標的細胞を同定する工程、
複数の前記同定された標的細胞に対する前記第1染色による染色の強度を測定して、個々の細胞に関する複数の細胞タンパク質の染色強度データを得て、各個別の細胞に関する細胞タンパク質染色強度データと関連する細胞位置座標データを記録する工程、
同定された標的細胞の各々における前記細胞タンパク質の染色強度と複数の標準細胞調製物の各々における前記細胞タンパク質の染色強度とを比較することにより、同定された標的細胞の各々において検出される染色された細胞タンパク質のレベルを確認する工程であって、前記複数が前記細胞タンパク質の異なる既知の発現レベルを有する複数の標準細胞調製物を含む工程、
前記切片の領域内の前記標的細胞の各々における前記細胞タンパク質の数量分布のマップを作成する工程
を含む方法。
IPC (4件):
G01N 33/574
, G01N 33/48
, G01N 33/53
, C12Q 1/68
FI (5件):
G01N33/574 D
, G01N33/48 P
, G01N33/53 D
, G01N33/53 Y
, C12Q1/68 A
Fターム (24件):
2G045AA26
, 2G045BA14
, 2G045BB20
, 2G045BB22
, 2G045BB24
, 2G045CB01
, 2G045CB02
, 2G045DA36
, 2G045FA16
, 2G045FA19
, 2G045FA37
, 2G045FB03
, 2G045FB12
, 2G045FB15
, 2G045GB01
, 2G045GC12
, 2G045JA01
, 4B063QA01
, 4B063QA19
, 4B063QQ08
, 4B063QQ42
, 4B063QR56
, 4B063QS32
, 4B063QX01
前のページに戻る