細胞ベースのセンサー

発明者： , , , , , , , ,
出願人/特許権者：
代理人 (1件)：清原義博
公報種別：公表公報
出願番号（国際出願番号）：特願2014-555087
公開番号（公開出願番号）：特表2015-505464
出願日： 2012年01月31日
公開日（公表日）： 2015年02月23日
要約：

細胞ベースのセンサー。本発明は、創薬に有用な新しい細胞ベースのセンサーに関し、該細胞ベースのセンサーは、専門的な調節されたエキソサイトーシスの調節された分泌顆粒に貯蔵されたレポーターポリペプチドとして非プロテアーゼヒドロラーゼによって形質移入された、および調節された分泌顆粒エキソサイトーシスのモジュレーターとして内因性または異種の分子のいずれかを有する、分泌顆粒の専門的な調節されたエキソサイトーシスを有する細胞株を含む。前記顆粒が貯蔵された非プロテアーゼ-ヒドロラーゼレポーターは、少なくとも: 他のプロテアーゼによるpH低下およびタンパク質分解などの顆粒内で既に存在する状態に対する高い耐性; エキソサイトーシス後の酵素活性; 高度に特異的な基質; 細胞解凍時の毒性の欠如; 刺激のない条件または基本条件下での非常に低いレベルの分泌; および高スループットの強力な及び高感度の検出のための細胞培養生存度および顆粒エキソサイトーシスと適合性のある培地における高度なシグナル対バックグラウンドアクティビティ、を有する。【選択図】図1

請求項（抜粋）：

細胞ベースのセンサーであって、該細胞ベースのセンサーは: a.分泌顆粒の調節されたエキソサイトーシスを有する造血細胞株; b.(a)の細胞株へと形質移入され、強力な構成的プロモーターまたは強力な誘導性プロモーターのいずれかの制御下で過剰発現された、顆粒が貯蔵された非プロテアーゼ-ヒドロラーゼレポーター; c.(a)の細胞株の分泌顆粒の調節されたエキソサイトーシスの、内因性のモジュレーターまたは形質移入された異種のモジュレーター; d.分泌された非プロテアーゼヒドロラーゼ活性の検出に特異的な、発色基質、蛍光基質または発光基質を含む群から選択される、細胞非透過性の基質、を含み; これによって、調節されたエキソサイトーシスのモジュレーターに対する特異的なリガンドの効果を測定することが可能となることを特徴とする、細胞ベースのセンサー。

IPC (10件)：

C12N 5/10 , C12N 15/09 , C12N 15/00 , C12Q 1/02 , C12Q 1/66 , C12Q 1/37 , C12Q 1/42 , C12Q 1/34 , C12M 1/00 , C12M 1/34

FI (10件)：

C12N5/00 102 , C12N15/00 A , C12N15/00 , C12Q1/02 , C12Q1/66 , C12Q1/37 , C12Q1/42 , C12Q1/34 , C12M1/00 A , C12M1/34 Z

Fターム (51件)：

4B024AA11 , 4B024AA20 , 4B024BA08 , 4B024BA11 , 4B024BA12 , 4B024BA14 , 4B024CA04 , 4B024CA07 , 4B024DA02 , 4B024EA04 , 4B024GA14 , 4B024HA11 , 4B029AA07 , 4B029BB01 , 4B029BB16 , 4B029BB17 , 4B029CC01 , 4B029FA12 , 4B029GB10 , 4B063QA01 , 4B063QQ08 , 4B063QQ13 , 4B063QQ22 , 4B063QQ33 , 4B063QQ35 , 4B063QQ36 , 4B063QQ79 , 4B063QQ96 , 4B063QR02 , 4B063QR13 , 4B063QR15 , 4B063QR16 , 4B063QR48 , 4B063QR77 , 4B063QR80 , 4B063QS02 , 4B063QS07 , 4B063QS36 , 4B063QX02 , 4B065AA90Y , 4B065AA92X , 4B065AA93Y , 4B065AB01 , 4B065AC14 , 4B065AC20 , 4B065BA03 , 4B065BD50 , 4B065CA28 , 4B065CA31 , 4B065CA33 , 4B065CA46

引用文献：

審査官引用 (10件)

Cytometry, 1999, Vol.36, pp.340-348
J. Biol. Chem., 2005, Vol280, No.5, pp.3885-3897
Biosensors Bioelectronics, 2004, Vol.19, pp.741-747

全件表示

前のページに戻る