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J-GLOBAL ID:201602211178386105   整理番号:16A0164288

93 5PはSmad5をターゲットすることマウスC3H10T1/2細胞の骨形成性分化を抑制する【Powered by NICT】

miR-93-5P SUPPRESSES OSTEOGENIC DIFFERENTIATION OF MOUSE C3H10T1/2 CELLS BY TARGETING Smad5
著者 (6件):
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巻: 29  号: 10  ページ: 1288-1294  発行年: 2015年 
JST資料番号: W1493A  ISSN: 1002-1892  CODEN: ZXCZEH  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的:miR-93 5pはSmad5,シリコンで予測した標的を標的とすることによってマウス間葉幹細胞(C3H10T1/2)の骨形成分化を抑制するかを検討した。方法Smad5 3’-ウトールシフェラーゼベクトル(プミーRB例~(TM))を構築し,二重ルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイによりSmad5はmiR-Oの93 5pの標的遺伝子であるかどうかを特定するためSmad5 3’-UTR-ルシフェラーゼ活性に及ぼすmiR-93 5Pの影響を調べるために採用した。Mir93 5p模倣体(M群),miR-Oの93 5p阻害剤(群),miR-93 5p模倣体陰性対照(MC群),およびmiR-93 5p阻害剤陰性対照(aadA2b群)が,C3H10T1/2細胞にトランスフェクトし,それぞれ,骨形成分化の誘導により追跡した。48時間後,リアルタイム蛍光定量PCR(qRTPCR)とウェスタンブロットアッセイはSmad5mRNAと蛋白質の相対的な発現を検出するために行った。14日で,骨形成分化におけるmiR-Oの93 5pの調節役割を実現するため,C3H10T1/2細胞の骨形成における細胞外カルシウム沈着をアリザリンレッド染色法で検査した。その結果,二重ルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイは,miR-93 5pはSmad5mRNAの3′-UTRに特異的に結合できることを示し,そのルシフェラーゼ活性(P<0.05)を阻害した。48時間後,qRT-PCR法(P>0.05)によるグループMとMC群とSmad5mRNAの相対的発現だけでなく群とaadA2b群の間に有意差は認められなかった。しかし,ウェスタンブロットアッセイの結果はMCとaadA2b(P<0.05)と比較した場合,Smad5蛋白質の相対的発現は,M群において有意に減少したことを示し,群で増加した。骨形成誘導後14日で,アリザリンレッド染色はM群の細胞外カルシウム沈着はMC群のそれより明らかに少なく,それはInC.群に比べ,A群で著明に高いことを示した。結論Smad5はmiR-93 5pの標的遺伝子である可能性がある。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】
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分類 (2件):
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運動器系疾患の外科療法  ,  細胞生理一般 
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