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J-GLOBAL ID:201602212016627504   整理番号:16A0157426

Bacillus pseudofirmus OF4株からのエクトインヒドロキシラーゼの結晶化とX線回折【Powered by NICT】

Crystallization and X-ray diffraction of an ectoine hydroxylase from Bacillus pseudofirmus OF4
著者 (7件):
資料名:
巻: 55  号: 11  ページ: 1468-1474  発行年: 2015年 
JST資料番号: C2382A  ISSN: 0001-6209  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 英語 (EN)
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【目的】Bacillus pseudofirmusO F4からのエクトインヒドロキシラーゼの結晶化とX線回折を研究した。[方法]著者らはH is6タグをB.pseudofirmusO F4から遺伝子ブペットドをクローン化し,大腸菌BL21(DE3)で過剰発現させた。次に,著者らは,Ni~(2+)-キレートアフィニティークロマトグラフィー及びサイズ排除クロマトグラフィーによる蛋白質ブペットドを精製した。その後,結晶は289Kで,シッティングドロップ蒸気拡散法による成長とインハウスX線源を用いて100Kで回折した。[結果]蛋白質ブペットドを発現し,精製することに成功した。著者らは,6.5mg/mLの蛋白質濃度での0.2mol/Lの塩化マグネシウム6水和物,0.1mol/Lビス-トリpH6.5,25%(W/V)ポリエチレングリコール3,350からなる溶液を用いて約360μm×240μm,60μmの回折結晶をうまく得られ,三斜晶系空間群P1における2.40Å分解能までのX線回折データを収集し,単位格子パラメータはa=45.18,b=58.87,c=68.81Å,α=77.48°,β=86.03°,γ=66.97)°である。非対称単位は約2.44A~3/Daのマッテウス係数と溶媒濃度は49.53%ブペットドの2分子を含んだ。[結論]X線回折データによれば,B.pseudofirmusO F4からブペットドの三次元構造はすぐに解析を行い,それはエクトイン水酸化酵素の生化学的特性への洞察を提供するであろう。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】
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微生物の生化学 
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