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J-GLOBAL ID:201602214324839344   整理番号:16A1390988

哺乳類の脳における蛋白質の局在性のIn Vivoゲノム編集による高性能高解像度マッピング

High-Throughput, High-Resolution Mapping of Protein Localization in Mammalian Brain by In Vivo Genome Editing
著者 (6件):
資料名:
巻: 165  号:ページ: 1803-1817  発行年: 2016年06月16日 
JST資料番号: A0707B  ISSN: 0092-8674  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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内因性タンパク質の細胞内局在性を正確に同定できる拡張可能で高性能な手法は,細胞を分子レベルで総合的に理解するために必須である。本稿では,哺乳類の脳組織の単一細胞内で内因性蛋白質を画像化するための,特異性,解像度,明暗差の高いシンプルかつ汎用化が可能な技術を開発する。clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)-Cas9に媒介される相同組換え修復によって内因性タンパク質を単一細胞標識するこの技術(SLENDR)は,CRISPR-Cas9介在相同組換え修復(HDR)によるin vivoゲノム編集を用いて目的とする遺伝子にエピトープタグまたは蛍光蛋白質をコードする配列を挿入する。単一細胞のHDR介在ゲノム編集は,分裂中の神経前駆体に子宮内電気穿孔法によって編集機構を送達して達成される。SLENDRによって,脳内の種々の細胞タイプ,領域,齢における内因性蛋白質の局在性と動態が迅速に測定される。従って,SLENDRは脳内の内因性蛋白質の細胞内局在性をマイクロメーターからナノメーターの解像度でマップするための高性能なプラットフォームを提供する。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.
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分類 (1件):
分類
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中枢神経系 

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