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J-GLOBAL ID：201602216743813510   整理番号：16A0112049

Ran過剰発現の構築と放射線誘発ゲノム不安定肝細胞のRNAiモデル【Powered by NICT】

Construction of Ran Overexpression and RNAi Models of Radiation-induced Genomic Unstable Hepatocytes

著者 (3件)： Yuan Yayi (China Inst. for Radiation Protection, Taiyuan) ,  Dang Xuhong (China Inst. for Radiation Protection, Taiyuan) ,  Liu Hongyan (China Inst. for Radiation Protection, Taiyuan)
資料名： Huazhong Keji Daxue Xuebao Yixueban  (Huazhong Keji Daxue Xuebao Yixueban)
巻： 44  号： 2  ページ： 180-185  発行年： 2015年 
JST資料番号： C2694A  ISSN： 1672-0741  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 放射線誘発ゲノム不安定性におけるRanの機能を明らかにするための有効なツールを提供する試みにおけるゲノム不安定細胞のRan過剰発現とRNAiモデルを構築すること。方法GenBankによれば,Ranの全長c DNA配列と負の配列を設計し,合成し,プラスミドGV218レンチウイルスベクターに挿入した。さらに,Ranと負の配列を標的とした干渉配列を設計し,合成し,プラスミドGV248レンチウイルスベクターに挿入した。ウエスタンブロットおよびqPCRは,それぞれ,Ran過剰発現とRNAi組換プラスミドを測定した。ウイルスパッケージングは,293T細胞へのトランスフェクションにより行った。ウイルス力価はqPCRと蛍光アッセイにより試験した。これらのレンチウイルスによる放射線誘発ゲノム不安定HL-7702肝細胞の感染後,Ran遺伝子の発現をqPCRにより検出した。結果配列決定の結果は,組換えプラスミドを構築することに成功し,293T細胞にトランスフェクトしたことを示した。ウイルスの力価は,RNAi組換プラスミドにおけるRan過剰発現組換プラスミドと3.0×10~8TU/mLの2.0×10~8TU/mLであった。RanはRNAを過剰発現するレンチウイルスベクターを感染させた細胞で効果的にアップレギュレートされ,過剰発現率は85%であった。RNAiレンチウイルスベクターはRanの発現を効果的に抑制することができ,遺伝子サイレンシング率は73%であった。結論ゲノム不安定細胞の過剰発現とRNAiモデルをRanを構築することに成功した,放射線誘発ゲノム不安定性におけるRanの機能を研究するための有効なツールを提供する。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】

シソーラス用語： 蛍光 ,  *RNA干渉 ,  ウイルス ,  DNA【核酸】 ,  レンチウイルス ,  ウェスタンブロット法 ,  *RNA【核酸】 ,  トランスフェクション ,  プラスミド ,  *ゲノム ,  *肝細胞
準シソーラス用語： ウイルス力価 ,  293T細胞 ,  レンチウイルスベクター ,  *過剰発現 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 細胞生理一般  (EF02010S)

タイトルに関連する用語 (10件)： Ran ,  過剰発現 ,  構築 ,  放射線 ,  誘発 ,  ゲノム ,  不安定 ,  肝細胞 ,  RNAi ,  モデル