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J-GLOBAL ID：201602218502915692   整理番号：16A0031561

MICB遺伝子とその応用のクローニングと発現抗MICB抗体の検出【Powered by NICT】

Cloning and expression of MICB gene and its application for the detection of anti-MICB antibodies

著者 (6件)： Ying Yanling (Inst. of Blood Transfusion, Blood Center of Zhejiang Province, Key Lab. for Blood Safety Res., Ministry of Health ...) ,  He Yanmin (Inst. of Blood Transfusion, Blood Center of Zhejiang Province, Key Lab. for Blood Safety Res., Ministry of Health ...) ,  Tao Sudan (Inst. of Blood Transfusion, Blood Center of Zhejiang Province, Key Lab. for Blood Safety Res., Ministry of Health ...) ,  He Ji (Inst. of Blood Transfusion, Blood Center of Zhejiang Province, Key Lab. for Blood Safety Res., Ministry of Health ...) ,  Zhu Faming (Inst. of Blood Transfusion, Blood Center of Zhejiang Province, Key Lab. for Blood Safety Res., Ministry of Health ...) ,  Lyu Hangjun (Inst. of Blood Transfusion, Blood Center of Zhejiang Province, Key Lab. for Blood Safety Res., Ministry of Health ...)
資料名： Zhonghua Weishengwuxue he Mianyixue Zazhi  (Zhonghua Weishengwuxue he Mianyixue Zazhi)
巻： 35  号： 8  ページ： 611-615  発行年： 2015年 
JST資料番号： C2322A  ISSN： 0254-5101  CODEN： ZWMZDP  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的は主要組織適合複合体クラスI鎖関連遺伝子B(MICB)のための原核生物発現系を構築し,腎移植患者における抗MICB抗体検出のためのELISA法を確立した。方法:MICB cDNA断片を対の特異的プライマーを用いたRT-PCRにより得られた。MICB c DNA及び原核細胞発現ベクターpET-28aは二種類の制限酵素による消化と組換え発現プラスミドpET28a MICBを構築するために結合した。形質転換組換え発現プラスミドを持つ大腸菌BL21DE3株はMICB蛋白質を発現するIPTGにより誘導された。発現した組換蛋白質はウエスタンブロットアッセイにより同定し,Ni-NTAスピンカラムにより精製した。精製蛋白質は腎移植患者における抗MICB抗体検出のためのELISAに結合させた。結果エキソン2と3を含む一般的なMICBフラグメント三が得られた。組換蛋白質をpET28a MICBを保有するE.coli BL21DE3株で発現させ,Ni-NTAスピンカラムで精製することに成功した。ウェスタンブロットアッセイの結果は,得られた蛋白質は標的蛋白質であることを確認した。ELISA法を確立し,使用腎移植患者24例における抗MICB抗体を検出するためのに成功した。吸光度値は三組換えMICB蛋白質の感度は異なることを示した。結論:MICB遺伝子のための発現系を構築することに成功した。抗MICB抗体の検出のための確立したELISAはMICB蛋白質と移植免疫の間の相関に更なる研究への道を開くであろう。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】

シソーラス用語： RT-PCR法 ,  *組換タンパク質 ,  DNA制限酵素 ,  cDNA ,  DNA【核酸】 ,  ウェスタンブロット法 ,  プラスミド ,  フラグメント ,  原核細胞 ,  ELISA ,  形質転換 ,  ガラクトシド ,  チオ糖 ,  ピラノシド ,  有機硫黄化合物
準シソーラス用語： 発現ベクター ,  原核生物発現 ,  *クローニング , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (4件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  抗原・抗体・補体一般  (ED04010A) ,  感染症・寄生虫症一般  (GD01010H) ,  微生物の生化学  (EG03020N)

物質索引 (1件)： イソプロピルチオガラクトシド

タイトルに関連する用語 (6件)： MICB ,  遺伝子 ,  応用 ,  クローニング ,  発現 ,  抗体