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J-GLOBAL ID：201602223569883350   整理番号：16A1238740

レンチウイルスベクターによって媒介されるカルシトニン遺伝子関連ペプチドは,幹細胞の活性に影響を及ぼす。【JST・京大機械翻訳】

Transfection of calcitonin gene-related peptide mediated by lentivirus vector in vitro and its effects on cardiac stem cell viability

著者 (5件)： Rong Jidong (Department of Cardiology,The First Affiliated Hospital,Zunyi Medical College) ,  Li Ling (Department of Cardiology,The First Affiliated Hospital,Zunyi Medical College) ,  Long Xianping (Department of Cardiology,The First Affiliated Hospital,Zunyi Medical College) ,  Deng Wenwen (Department of Cardiology,The First Affiliated Hospital,Zunyi Medical College) ,  Shi Bei (Department of Cardiology,The First Affiliated Hospital,Zunyi Medical College)
資料名： Zhongguo Bingli Shengli Zazhi  (Zhongguo Bingli Shengli Zazhi)
巻： 32  号： 8  ページ： 1445-1449,1456  発行年： 2016年 
JST資料番号： W1465A  ISSN： 1000-4718  CODEN： ZBSZEB  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的;カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)を運ぶレンチウイルスの体外トランスフェクションがラットC-KITPOSの心臓筋細胞(C-KIT)の活性に与える影響を検討する。方法;無菌条件下でSDラットの心耳を摘出し、酵素消化法と免疫磁気ビーズ法を用いてC-KIT+ CSCSを獲得し、そしてフローサイトメトリーにより同定を測定した。標的遺伝子を含む組換えレンチウイルスベクター(LV-EGFP-CGRP)と空ベクター(LV-EGFP)をそれぞれCKIT+ CSCSにトランスフェクションし、実験を3つのグループに分けた。LV-EGFP-CGRP-CSCS群,LV-EGFP-CSCS群,およびCSCS群。蛍光顕微鏡下でトランスフェクションの状況を観察し、フローサイトメトリーによりそのトランスフェクション率を測定し、ELISAにより各群の培養上清中のCGRP濃度を測定し、CCK-8法を用いてC-KIT+ CSCS活性に対するレンチウイルストランスフェクションの影響を測定した。【結果】;C-KIT+CSCSの分離と培養は,C-KIT(91.0%)の高い発現を示し,CD45とCD34の発現は低かった。レンチウイルスをトランスフェクションしたラットC-KIT+CSCSは緑色蛍光を発現し、48時間後に安定的に発現し、MOI(20)を感染した場合、蛍光顕微鏡観察とフローサイトメトリーの結果はいずれもトランスフェクション率が80%以上に達したことを示した。ELISAの結果は,LV-EGFP-CGRPCSCS群の上清におけるCGRP分泌量が,LV-EGFP-CSCS群およびCSCS群よりも有意に増加したことを示した(P<0.01)。CCK-8によって検出された細胞生存率は,C-KIT+CSCSの活性に影響を及ぼさないことを示した。結論;CGRPを運ぶレンチウイルスベクターは,C-KIT+CSCSに形質移入し,LV-EGFP-CGRPをトランスフェクトしたC-KIT+CSCSは,CGRP蛋白質を分泌することができた。C-KIT+CSCSの活性は,トランスフェクション後に影響を受けなかった。これは遺伝子工学細胞療法による心筋梗塞の治療に新しい理論的及び実験的根拠を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *レンチウイルス ,  心筋梗塞 ,  蛍光 ,  *ベクター ,  フローサイトメトリー ,  トランスフェクション ,  蛍光顕微鏡 ,  細胞移植 ,  心筋細胞 ,  ELISA ,  酵素的分解
準シソーラス用語： 細胞生存率 ,  蛍光顕微鏡法 ,  EGFP ,  *レンチウイルスベクター , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Calcitonin gene-related peptide ,  Lentiviral vector ,  Cardiac stem cell ,  Cell viability

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (4件)： レンチウイルスベクター ,  カルシトニン遺伝子関連ペプチド ,  幹細胞 ,  活性