文献

J-GLOBAL ID：201602226426957449   整理番号：16A1258681

PTD-FNK蛋白質の原核生物発現と精製を同定した。【JST・京大機械翻訳】

Prokaryotic epression, prurification and identification of PTD-FNK protien

著者 (8件)： Wang Xiaoye (College of Animal Science and Technology,Guangxi University) ,  Shi Bomei (College of Animal Science and Technology,Guangxi University) ,  Wang Yingqun (Guangxi Work Station of Livestock & Poultry Breed Improvement) ,  Liu Deyu (Guangxi Work Station of Livestock & Poultry Breed Improvement) ,  Li Ming (Guangxi Work Station of Livestock & Poultry Breed Improvement) ,  Li Fangfang (Guangxi Work Station of Livestock & Poultry Breed Improvement) ,  Li Xun (College of Animal Science and Technology,Guangxi University) ,  Hu Chuanhuo (College of Animal Science and Technology,Guangxi University)
資料名： Nanfang Nongye Xuebao  (Nanfang Nongye Xuebao)
巻： 47  号： 6  ページ： 1019-1024  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2960A  ISSN： 2095-1191  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】本研究の目的は,PTD-FNK蛋白質の抗アポトーシス機構を研究し,その精液の凍結保存におけるその応用を促進するために,BCL-XL蛋白質を発現する突然変異体PTD-FNK蛋白質を発見することであった。【方法】2つの突然変異プライマーをFNKのヌクレオチド配列に従って設計し,2つの突然変異体をPET-28A(+)-PTD-BCL-XLプラスミドを鋳型としてPCRによって増幅した。組換えプラスミドを大腸菌DH5Αに形質転換し,IPTGにより誘導した融合蛋白質の発現を誘導し,IPTGにより誘導された発現の最適温度を探索した。精製蛋白質をSDS-PAGE電気泳動とウェスタンブロット法によって同定した。[結果]2つの突然変異体のPCR増幅産物のサイズはそれぞれ462と5616BPであり、DPN I消化後に組換え反応を行い、さらに大腸菌DH5Αに転化し、PET-28A(+)-PTD-FNKプラスミドを構築することができた。可溶性PTD-FNK蛋白質を30°Cで7時間IPTGによって誘導し,そして,融合蛋白質をNI-NTAアフィニティークロマトグラフィーによって精製し,PTD-FNK蛋白質として同定した。【結論】IPTG誘導温度を調整することによって,PTD-FNK蛋白質を可溶性で発現させることができ,誘導時間は短く,蛋白質の精製と蛋白質の精製には好適である。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： SDS-PAGE ,  突然変異 ,  消化 ,  形質転換 ,  ヌクレオチド配列 ,  可溶性 ,  融合タンパク質 ,  精液 ,  ウェスタンブロット法 ,  プラスミド ,  *タンパク質 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  凍結保存 ,  PCR法 ,  溶解性
準シソーラス用語： 最適温度 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： PTD-FNK protein ,  site-specific mutagenesis ,  prokaryotic expression ,  prurification and identification

分類 (4件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  微生物の生化学  (EG03020N) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N)

タイトルに関連する用語 (4件)： 蛋白質 ,  原核生物発現 ,  精製 ,  同定