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J-GLOBAL ID:201602227665052428   整理番号:16A1155559

エストロゲン受容体Β遺伝子プロモータールシフェラーゼレポーター遺伝子ベクターの構築とリポキシンの転写活性への調節【JST・京大機械翻訳】

Construction of Luciferase Reporter Gene Vector Containing Human ERBeta Promoter and Regulation of Lipoxin A4 on Its Transcriptional Activity
著者 (7件):
資料名:
巻: 32  号:ページ: 427-430  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2468A  ISSN: 1003-6946  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的;ヒトエストロゲン受容体Β(ERΒ)遺伝子プロモーターを含むルシフェラーゼレポーター遺伝子ベクターを構築し,その転写活性に対するアスピリン誘発性リポキシン(LXA_4)の影響を検討した。方法;子宮内膜間質細胞のゲノムDNAを鋳型とし、PCR技術を用いてERΒプロモーター配列を増幅し、ルシフェラーゼレポーター遺伝子ベクターPGL3-BASICに挿入し、PGL3-BASIC-ERΒレポーター遺伝子ベクターを構築した。ダブルと配列決定を行った後、上記のベクターとPCMX-ΒGALベクターを共に293T細胞にトランスフェクションした後、異なる濃度(0.1、1、10、100NMOL/L)のLXA_4で24時間刺激し、その後細胞を分解し、蛍光酵素の活性を測定した。【結果】;配列決定の結果は,PGL3-BASIC-ERΒルシフェラーゼレポーター遺伝子配列が正しいことを示した。293T細胞において、PGL3-BASIC-ERΒレポーター遺伝子ベクターは空ベクターPGL3-BASICと比較し、PGL3-BASIC-ERΒレポーター遺伝子ベクターの転写活性はほぼ10倍向上した。ルシフェラーゼレポーターシステムにより、LXA_4濃度が0.1、1、10、100NMOL/Lの時、その相対蛍光強度は対照群と比較して明らかに上昇した(P<0.05)。10NMOL/Lの濃度での相対的蛍光強度は他の濃度より有意に高かった(P<0.05)。結論;PGL3-BASIC-ERΒルシフェラーゼレポーター遺伝子ベクターの構築に成功し、一定濃度のLXA_4の刺激下でERΒプロモーター領域の転写活性が上昇し、LXA_4濃度が10NMOL/Lの時、転写活性が最も高い値に達することが証明された。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】
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遺伝子発現  ,  代謝一般 

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