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J-GLOBAL ID:201602243776275228   整理番号:16A1139772

黄枝 KETELEERIAのISSR-PCR反応系の確立と最適化【JST・京大機械翻訳】

Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Keteleeria calcarea Cheng et L.K.Fu
著者 (6件):
資料名:
巻: 35  号:ページ: 17-21  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2519A  ISSN: 1001-4705  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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最初に,直交配列設計を用いて,ISSR-PCR増幅効果に影響するMG(2+),TAQ DNAポリメラーゼ,DNTP,プライマー,テンプレートDNA,サイクル数およびアニーリング温度を,単一因子設計によって最適化した。黄枝の最適反応系とプログラムを確立した。すなわち、25ΜLのシステムに2.0MMOL/LのMG(2+)、1.5U TAQ DNAポリメラーゼ、0.10MMOL/LのDNTP、1.0ΜMOL/Lのプライマー、30NGの鋳型DNA及び2.5ΜL 10×PCRバッファを含む。その他の滅菌用のDDH_2O補充は25ΜLであった。増幅プログラム:94°C,5MIN;94°C変性30S、48~56°C(異なるプライマー、アニーリング温度は異なり、具体的なプライマーによって固定)は45S、72°Cで90S延伸し、以上の3つのステップは50回循環した。最後に72°Cで7MIN延伸した。増幅産物を4°C冷蔵庫に保存した。このシステムとプログラムの安定性は良好であり、結果は信頼性があり、黄枝の遺伝的多様性の分析に用いることができる。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】
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分子遺伝学一般 
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