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J-GLOBAL ID:201602249183692466   整理番号:16A0808869

」に基づいてセグメント化」-」完全」変換のG-四重螺旋デオキシリボヌクレアーゼセンサはポリヌクレオチドキナーゼの検出に用いる【JST・京大機械翻訳】

G-Quadruplex DNAzyme Biosensor for Quantitative Detection of T4 Polynucleotide Kinase Activity by Using Split-to-Intact G-Quadruplex DNAzyme Conversion
著者 (4件):
資料名:
巻: 44  号:ページ: 13-18  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2394A  ISSN: 0253-3820  CODEN: FHHHDT  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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」セグメント」を」完全G”に変換するために-四重螺旋デオキシリボヌクレアーゼの戦略を採用して,検出多ポリヌクレオシドキナーゼ(T4 PNK)センサを構築した。形成したG-四重螺旋複合体の富G配列PS5。M配列5’と3’末端ヒドロキシル基でいずれも2本鎖:に分割しSとOH_1S_鎖鎖2OH,すなわちそれぞれ12個の塩基の」セグメント」のPSを持つ。5M。ATPの存在下,T4 PNK酵素鎖S_2OHの5’末端のヒドロキシリン酸化を,S_2Pに変換することが可能である;S_1OH)、S_2PおよびHELPER鎖Hに存在するSで,T4 DNAリガーゼ(T4DNA LIGASE)鎖SとOH_1S_2鎖を結ぶP」完全な」PS5を。M配列。系において再エキソヌクレアーゼIII(EXO III)を加えて,SとHの3’端から剪断SH,PS5を放出した。M。K+存在下で,PS5。Mと塩化ヘミン(HEMIN )作用,形成様酸化物複合体の酵素活性を持つ,_2触媒H_2O2酸化,2’′-アジノ-2(3-エチル-ベンゾチアゾール-6-スルホン酸)二アンモニウム塩(ABTS)との反応を,酸化生成物検出により418NMの吸収値変化,T4 PNK活性の定量的検出を実現した。線形検出範囲は0.02~3.0U/ML,検出限界は0.014U/ML (S /N=3)であった であった。HELA細胞とHEK293細胞の実サンプルのT4 PNK活性に対して検出を行い,平均回収率は95.6%~105.7%であった。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】
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著者キーワード (4件):
分類 (2件):
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生化学的分析法  ,  酵素一般 
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