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J-GLOBAL ID:201602258491084244   整理番号:16A0702178

IL-4は抗全ヒト一本鎖抗体のスクリーニングと同定【JST・京大機械翻訳】

Selection and identification of completely humanized anti-IL-4 single-chain antibodies
著者 (5件):
資料名:
巻: 31  号: 12  ページ: 1698-1701  発行年: 2015年 
JST資料番号: C2523A  ISSN: 1007-8738  CODEN: XFMZFM  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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発現を得ることを目的としたヒト白血球細胞でのインターロイキン4(IL-4),全ヒト一本鎖抗体(SCFV)ライブラリーの中からIL-4の全ヒトSCFVを抗異方性Jian定其特スクリーニング。この方法ではイソプロピル-Β-D-チオガラクトシド(IPTG)による誘導後PET102/IL-4/BL21発現IL-4を採用し,精製,同定を行った源の全ヒト抗体のファージ発現ライブラリーを用いて抗IL-4の全ヒトSCFV発現のIL-4を抗原として用いて,スクリーニング陽性クローン菌株によりPCRおよび制限酵素消化とシークエンシングにより同定した。斑点を用いて抗IL-4 SCFVの特異性ハイブリダイゼーション。その結果発現のIL-4融合蛋白質の相対分子質量(M_R)は,27 000であった。この抗原を用いて抗発現IL-4の陽性クローンをスクリーニングし,PCRの結果は示した,約1000 BP増幅の目的バンドがある。制限酵素消化の結果は,2株のクローンのフィンガープリントがある同一で,残りがいずれも異なる。フィンガープリントの違いがまたIL-4結合能力と強い4つのSCFVクローンを選び配列決定を行って,3つの配列が正しいことをあることを示した。ドットブロットでは,この3株のクローンの発現SCFVは,いずれも特異性を有することを示した。結論:成功的に抗IL-4は全ヒトSCFVからスクリーニングした。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】
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遺伝子発現 
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