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J-GLOBAL ID:201602262555534069   整理番号:16A0702161

2型デング熱ウイルス非構造蛋白質NS3の発現,及びその相互作用蛋白質の精製【JST・京大機械翻訳】

Expression of Dengue virus type 2 nonstructural protein 3 and isolation of host proteins interacting with it
著者 (8件):
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巻: 31  号: 12  ページ: 1588-1592  発行年: 2015年 
JST資料番号: C2523A  ISSN: 1007-8738  CODEN: XFMZFM  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的2型デング熱ウイルス(DENV2)非構造蛋白質3(NS3)とアフィニティータグ融合蛋白質の発現プラスミドを構築し,タンデムアフィニティ精製(TAP)法とNS3の相互作用蛋白質を得た。方法はDENV2遺伝子配列に従って,プライマーを設計した;酵素消化後までタンデムアフィニティータグ(FLAG-STREPキット(II)を含むクローンの哺乳類は,真核生物ベクターPCI-SFを発現しDENV2 CDNA,NS3遺伝子をPCR増幅した鋳型を,組換えプラスミドPCI-NS3-SF発現を獲得した;上記組換えプラスミドがトランスフェクション試薬LIPOFECTAMINE(TM)2000によって一過性のHEK293T細胞に入るし,WESTERN BLOT法で検証するNS3融合蛋白質の発現;NS3と相互作用する蛋白質をTAP法により分離精製。この結果はNS3融合蛋白質発現ベクターの構築に成功し,NS3蛋白質との相互作用の宿主蛋白質を分離し,TAPシステムを利用した。結論:直列アフィニティー精製法できる有効な分離とDENV2 NS3の相互作用の細胞蛋白質。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (3件):
分類
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遺伝子操作  ,  動物の生化学  ,  細胞膜の受容体 

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