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J-GLOBAL ID：201602279492684876   整理番号：16A0964561

ピーナッツアレルゲン蛋白質ARA H 6遺伝子のクローニングと原核発現【JST・京大機械翻訳】

Gene Cloning and Prokaryotic Expression of Peanut Allergen Ara h 6

著者 (5件)： Zhan Shaode (State Key Laboratory of Food Science and Technology, Sino-German Joint Research Institute, Nanchang University) ,  Qiu Changjiang (Zhejiang Fashion Institute of Technology) ,  Zhu Pan (Center for Disease Control and Prevention of Guangdong Province) ,  Wu Zhihua (State Key Laboratory of Food Science and Technology, Sino-German Joint Research Institute, Nanchang University) ,  Chen Hongbing (State Key Laboratory of Food Science and Technology, Sino-German Joint Research Institute, Nanchang University)
資料名： Shipin Kexue  (Shipin Kexue)
巻： 37  号： 3  ページ： 125-130  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2151A  ISSN： 1002-6630  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 本実験ではピーナッツの中から総RNAを最初に抽出して,逆転写重合連鎖反応技術を用いてピーナッツアレルゲン蛋白質ARA H6の全CDNAをクローニングし,これをテンプレートとARA H 6目の遺伝子を増幅しする。目的遺伝子とPMD19-T SIMPLEプラスミドの組換えを行った後へ転入したBL21(DE3)宿主発現菌中,イソプロピル-Β-D-ピランガラクトースGan誘導発現生成物はチオ,ニッケルイオンを用いてアフィニティークロマトグラフィーで精製した発現産物。DNAシークエンシングの結果はARA H6遺伝子の完全長フラグメントは438BPであり,145個のアミノ酸をコードし,既知の蛋白質のこのDNA配列97%と同じであるを示した;12ドデシル硫酸ナトリウム-ポリアクリルアミドゲル電気泳動の結果は発現産物の分子量は24 KDであり,融合とヒスチジン酸タグの組換えARA H 6蛋白質の理論分子量は一致を示した;質量分析同定の結果により組換え蛋白質の一次構造と天然ARA H6スコアは100%であった;WESTERN BLOTTINGの結果には,融合タンパク質ができる抗ARA H6ポリクローナル抗体による認識,持つ免疫原性を示した。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *ナンキンマメ ,  融合タンパク質 ,  *タンパク質 ,  ポリクローナル抗体 ,  *遺伝子 ,  組換タンパク質 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  免疫原性 ,  分子量 ,  プラスミド ,  DNA配列 ,  DNA配列解析 ,  ニッケルイオン ,  *クローニング ,  化学分析 ,  解析 ,  分析 ,  生化学的分析 ,  アミノ酸 ,  窒素複素環化合物 ,  第一アミン

著者キーワード (5件)： peanut ,  allergen ,  Ara h 6 ,  recombinant expression ,  mass spectrometry

分類 (1件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J)

物質索引 (1件)： ヒスチジン

タイトルに関連する用語 (5件)： ピーナッツ ,  アレルゲン蛋白質 ,  遺伝子 ,  クローニング ,  発現