文献

J-GLOBAL ID：201602284820263022   整理番号：16A0982605

発現ベクターPET22B-FGFR1の構築と大腸菌における発現を【JST・京大機械翻訳】

The construction of expression vector pET22b- FGFR1 and expression in Escherichia coli

著者 (6件)： Dong Yuan (School of Medical Laboratory,Jilin Medical University) ,  Feng Chun (School of Medical Laboratory,Jilin Medical University) ,  Ma Xinyu (School of Medical Laboratory,Jilin Medical University) ,  Cao Huan (School of Medical Laboratory,Jilin Medical University) ,  Zheng Shihui (School of Medical Laboratory,Jilin Medical University) ,  Wang Huiyan (School of Medical Laboratory,Jilin Medical University)
資料名： Shenyang Yaoke Daxue Xuebao  (Shenyang Yaoke Daxue Xuebao)
巻： 33  号： 4  ページ： 313-316,320  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2350A  ISSN： 1006-2858  CODEN： SYDXFF  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的と人の線維芽細胞成長因子受容体(FIBROBLAST GROWTH FACTOR RECEPTOR(FGFR1)1細胞外ドメインの遺伝子工学菌発現,その発現条件に対して最適化を行うを構築した。この方法では,肝癌細胞HEPG2をテンプレートとして,FGFR1細胞外ドメインを増幅する逆転写-ポリメラーゼ連鎖反応法(REVERSE TRANSCRIPTION-POLYMERASE CHAIN REACTION,RT-PCR)を利用した,と発現ベクターPET22Bに接続後,大腸菌BL21(DE3)中に形質転換し,ラクトースを用いてそれに対して誘導を行う,発現に及ぼす、SDS-PAGE電気泳動分析とインデューサの濃度,誘導時間,誘導タイミング、及び誘導の温度などの影響による。結果は,FGFR1細胞外ドメインフラグメントを増幅する成功,600 BPの長さであり。制限酵素消化と配列決定によって確認し得たFGFR1細胞外ドメイン遺伝子配列の予想と一致を経て,構築したベクターPET22B-FGFR1,FGFR1細胞外ドメイン蛋白質を首尾よく発現し,発現量と蛋白質質量分率は20%以上で,最適発現条件は次の通りであった。工学菌のA600の値が0.8であるとき,最終質量濃度は2.0GL(- 1)のラクトースを添加した使い捨てであったが,37°Cでは3H蛋白質発現量を最大に達した誘導,この発現をWESTERN BLOTTINGによりできる生成物とヒトFGFR1抗体の特異性を結合するクローンを検出した。結論1細胞外ドメイン蛋白質のヒトFGFR遺伝子工学菌発現構築に成功し,ラクトースがFGFR1細胞外ドメイン蛋白質の発現を誘導することを,将来の研究のために良好な基礎を提供する。Data from the ScienceChina, LCAS.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： PCR法 ,  線維芽細胞 ,  クローン ,  *ベクター ,  SDS-PAGE ,  最適化 ,  ヒト ,  DNA制限酵素 ,  *FGF受容体 ,  形質転換 ,  ヘキソース ,  アルドース ,  ガラクトシド ,  二糖類 ,  ピラノシド
準シソーラス用語： 遺伝子配列 ,  エクトドメイン ,  *FGF受容体1 ,  *発現ベクター , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (3件)： FGFR1 ,  lactose induction ,  expression

分類 (2件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  酵素一般  (EB09010D)

物質索引 (1件)： ラクトース

タイトルに関連する用語 (5件)： 発現ベクター ,  FGFR1 ,  構築 ,  大腸菌 ,  発現