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J-GLOBAL ID：201702212569282429   整理番号：17A1523920

ヒツジeIF3h遺伝子クローニング、原核発現及び蛋白同定【JST・京大機械翻訳】

Cloning, Prokaryotic Expression and Protein Identification of eIF3h Gene from Ovis aries

著者 (6件)： Yu Changjiang (塔里木大学動物科学学院,新疆阿拉爾 843300;綿羊遺伝改良与健康養殖国家重点実験室,新疆石河子 832000) ,  Qi Chengnian (塔里木大学動物科学学院,新疆阿拉爾,843300) ,  Zhang Yunsheng (綿羊遺伝改良与健康養殖国家重点実験室,新疆石河子,832000) ,  Chen Min (綿羊遺伝改良与健康養殖国家重点実験室,新疆石河子,832000) ,  Yang Hua (綿羊遺伝改良与健康養殖国家重点実験室,新疆石河子,832000) ,  Yang Yonglin (綿羊遺伝改良与健康養殖国家重点実験室,新疆石河子,832000)
資料名： Xinjiang Nongye Kexue  (Xinjiang Nongye Kexue)
巻： 54  号： 2  ページ： 386-392  発行年： 2017年 
JST資料番号： C3029A  ISSN： 1001-4330  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： [目的]ヒツジの真核生物翻訳開始因子eIF3hをクローニングし、原核細胞発現ベクターを構築し、外因性タンパク質の発現を誘導し、Hisタグを持つ目的タンパク質を検出、同定する。【方法】GenbankにおけるヒツジeIF3h遺伝子CDS配列に従って,プライマーを設計し,DNA断片をPCRにより増幅し,pET28α(+)ベクターに挿入した。組換えプラスミドをE.coli BL21(DE3)株に導入し,eIF3h蛋白質発現を誘導した。標的蛋白質の発現をSDS-PAGEにより分析し,標的蛋白質をWestern blotにより検出し,同定し,蛋白質発現をウェスタンブロット法により検出した。[結果]ヒツジのeIF3h遺伝子CDSの配列を正しく、完全にクローンし、フラグメントの全長は1059bpであった。組換えプラスミドをE.coli BL21(DE3)株に形質転換した後,37°C,1mmol/LのIPTGで3.5時間誘導した後,封入体の形で存在する標的蛋白質を得て,分子量は約40kDであった。[結論]完全で正確なヒツジeIF3h遺伝子CDS配列断片を獲得し、この遺伝子の原核発現ベクターを構築し、ヒツジeIF3h遺伝子の外因性発現を誘導する目的タンパク質を成功させ、ヒツジeIF3h遺伝子の後続研究に科学データを提供した。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 真核生物 ,  SDS-PAGE ,  封入体 ,  プラスミド ,  ウェスタンブロット法 ,  *遺伝子 ,  *遺伝子クローニング ,  *タンパク質 ,  原核細胞 ,  形質転換 ,  ベクター
準シソーラス用語： 標的蛋白質 ,  蛋白質発現 ,  発現ベクター ,  *クローニング , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： ovis aries ,  eIF3h gene ,  vector construction ,  prokaryotic expression

分類 (2件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N)

タイトルに関連する用語 (5件)： ヒツジ ,  遺伝子クローニング ,  発現 ,  蛋白 ,  同定