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J-GLOBAL ID：201702212680457717   整理番号：17A1790267

TGF-β1を安定的に発現させるラット心筋細胞H9c2細胞株の構築と同定【JST・京大機械翻訳】

Construction and identification of rat cardiomyocyte H9c2 cell line with stable and high expression of TGF-β1.

著者 (4件)： Xu Shuwen (武漢大学人民医院検験科,湖北 武漢,430060) ,  Li Yan (武漢大学人民医院検験科,湖北 武漢,430060) ,  Li Jiqiang (武漢市第一医院神経外科,湖北 武漢,430022) ,  Dai Wen (武漢大学人民医院検験科,湖北 武漢,430060)
資料名： Hainan Yixue  (Hainan Yixue)
巻： 28  号： 11  ページ： 1721-1724  発行年： 2017年 
JST資料番号： C3657A  ISSN： 1003-6350  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:TGF-β1を安定的に発現するラット心筋細胞H9c2細胞株を構築し、同定する。方法:RNA干渉技術を用いて、pEGFP-TGF-β1プラスミドを抽出し、ABI3130遺伝子配列決定器を用いてシークエンシングを行い、同定したプラスミドをラット心筋細胞H9c2細胞株にトランスフェクションし、G418を用いてトランスフェクションしたH9c2細胞をスクリーニングした。トランスフェクション後のH9c2細胞をRT-PCRとWestern blotにより同定した。本実験はpEGFP-TGF-β1プラスミドとpEGFP対照プラスミドをトランスフェクションした細胞株をpEGFP-TGF-β1プラスミド群とpEGFP対照プラスミド群に分けた。結果:pEGFP-TGF-β1プラスミドの配列決定結果はTGF-β1配列を含み,スクリーニング後のpEGFP-TGF-β1プラスミド群とpEGFP対照プラスミド群の細胞トランスフェクション効率はそれぞれ85%と93%RT-PCRの結果により示した。TGF-β1 mRNAの発現は,対照群(1.037±0.022)と比較して有意に増加した(t=3.056,P=0.028)。Western blotの結果により、pEGFP-TGF-β1プラスミドのトランスフェクション群のTGF-β1タンパクの相対発現量は(3.275±0.234)で、対照群の(1.011±0.015)より明らかに高かった。それらの間には有意差があった(t=4.372,P=0.015)。結論:本研究で構築したラット心筋細胞H9c2細胞株はTGF-β1を安定的に発現でき、後続のTGF-β1のラット心筋細胞における生物学的作用及び関連シグナル伝達経路の研究に用いることができる。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： トランスフェクション ,  RT-PCR法 ,  *心筋細胞 ,  mRNA ,  RNA干渉 ,  スクリーニング ,  プラスミド ,  タンパク質
準シソーラス用語： 対照群 ,  トランスフェクション効率 ,  *細胞株 ,  配列解析 ,  遺伝子配列 ,  *H9c2細胞 ,  *TGFβ1 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Rat cardiomyocyte ,  H9c2 cell line ,  Transforming growth factor-β1 (TGF-β1) ,  Plasmid

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (7件)： 発現 ,  ラット ,  心筋細胞 ,  H9c2細胞 ,  株 ,  構築 ,  同定